一、色谱法的发展概况 色谱法的创始人是俄国植物学家.pptVIP

一、色谱法的发展概况 色谱法的创始人是俄国植物学家Tsweet。 20世纪30与40年代相继出现了薄层色谱和纸色谱，与柱色谱一起统称为经典的液相色谱法，使色谱法成为一门分离技术。 20世纪 50年代气相色谱的兴起，使色谱法在理论、仪器以及分离与“在线”分析等方面得到长足发展，奠定了现代色谱法的基础。 二、色谱法的分类 （一）按两相的分子聚集状态分类 液相色谱法（LC）：流动相为液体的色谱法。 气相色谱法（GC）：流动相为气体的色谱法。 是以超临界流体作为流动 相的一种色谱法。 课堂互动 请阐述色谱法的分类方法？ 三、色谱过程 色谱法具有相对运动的两相，其一是固定不动的，称为固定相（stationary phase）；而另一相则是携带试样向前移动的，称为流动相（mobile phase）。 色谱过程是物质在相对运动的固定相和流动相之间达到分配平衡的过程。例：顺式与反式偶氮苯的色谱过程。 第二节 色谱法的基本概念 一、色谱图 色谱流出曲线 基 线 ：是在操作条件下，仅有流动相通过检测系统时所 产生的信号曲线。 色谱峰 ：色谱流出曲线上的突起部分。分为对称峰与不对 称峰，后者又分为前延峰和拖尾峰。 对称峰与不对称峰可用对称因子（fs）或拖尾因 子（T）来衡量。 fs处于0.95～1.05之间为对称峰；小于0.95者为前延 峰；大于1.05者为拖尾峰。 色谱流出曲线上，一个组分的色谱峰可用峰位、峰高或峰面积及色谱峰的区域宽度等三项参数描述，分别作为定性、定量及衡量柱效的依据。 色谱流出曲线和色谱峰区域宽度 标 准 差（?） ： 正态分布曲线上两拐点间距离的一半 半峰宽 （W1/2）： 峰高一半处的峰宽称为半峰宽。 　　　　　　　　 W1/2 = 2.355?　 峰 宽 （W）： 通过色谱峰两侧拐点作切线，在基线 上所截得的距离称为峰宽。 　　　　　 W = 4? 或　W = 1.699 W1/2 保留体积（VR） ：某组分在保留时间内流动相流经色谱柱的体 积 。 　　　　　　　 VR = tR·Fc 死体积（VM或V0）：由进样器至检测器的流路中未被固定相占 据的空间称为死体积。死体积大，色谱 峰扩展，色谱柱的柱效降低。 　　　　　　 VM = tM·Fc 三、分配系数（Distribution Coefficient，K） 分配系数越小，组分的迁移速度越快，保留时间越短，即先流出色谱柱；反之亦然。 分配系数不等是组分分离的前提。 四、分离参数 分离度（resolution，R） 第三节 基本色谱法的分离机制 一、吸附色谱法分离机制 吸附色谱法是以吸附剂为固定相，液体（或气体）为 流动相，利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异进行分离 的色谱法。 二、分配色谱法分离机制 分配色谱法是利用混合物中的不同组分在固定相和 流动相中的溶解度不同，即在两相中的分配系数不同而实 现分离的。 分离机制：流动相携带样品流经固定相时，各组分在两相 间不断地进行溶解、萃取，再溶解、再萃取， 如此多次后，使分配系数稍有差异的组分得以 分离。 三、离子交换色谱法分离机制 离子交换色谱法是利用被分离组分离子交换能力的差别而实现分离的。 分离机制： 分离的离子随流动相流经离子交换树脂时，与离子交换树脂上可被交换的离子连续进行竞争交换，因不同离子与交换树脂的竞争交换能力不同，其迁移的速度亦不