丹参注射液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究.pdfVIP

维普资讯 ·210 · 中国中西医结合急救杂志 2006年 7月第 13卷第 4期 ChinJTCM wMCritCale，July2006，Vol ! ． · 论 著 · 丹参注射液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化 为神经元样细胞 的实验研究 余 勤 ，连俊 兰。，郭 莹 (1．浙江中医药大学生物工程学系 ，浙江 杭州 310053； 2．杭州市红十字会医院儿科 ，浙江 杭州 310003) 【摘要】 目的：探讨丹参注射液在体外诱导大鼠骨髓 间充质干细胞 (rMSCs)向神经元样细胞分化的作用 。 方 法：采用贴壁筛选法分离 rMSCs，并通过不断传代进行纯化和扩增培养 。采用含丹参注射液 的无血清 Dulbecco改 良Eagle培养基 (DMEM)／F一12培养液诱导 rMSCs分化为神经元样细胞 ，观察不同浓度丹参注射 液对rMSCs诱导分化为神经元样细胞 的影响。通过观察rMSCs经诱导后细胞 的形态变化和采用免疫组化方 法检测神经元特异性核蛋 白(NeuN)、神经丝蛋 白(NF—M)、胶质纤维酸性蛋 白(GFAP)的表达来鉴定神经元 样细胞 。结果：经丹参注射液诱导后 ，rMSCs胞体收缩 ，突起伸 出，形似神经元 ；免疫组化显示诱导出的神经元 样细胞 NeuN、NF—M表达 阳性，GFAP阴性 。丹参注射液在浓度为 10ml／L时的诱导作用最为显著 。结论 ：丹 参注射液可以在体外诱导 rMSCs分化为神经元样细胞 ，其诱导分化率与丹参注射液的浓度有关。 【关键词】 骨髓 间充质干细胞 ；神经元 {丹参注射液 ；诱导分化 {大鼠 中图分类号 ：R285．5；Q254 文献标识码 ：A 文章编号 ：1008—9691(2006)04—0210—05 Experimentalstudy on differentiation of bone mesenchymal stem cells into neuron,·like cellswith salvia miltiorrMzainjection YU Qinl。LlAN 3un．-lan2，GUoYirg1．1．Departmento ＆o—enginee“ng，Zhefiang University of TracHtionalChineseMedicine，Hangzhou 310053，Zhejiang，China{2 Departmentof Pediatrics，HangzhouRed-crossHospital，Hangzhou310003，Zhefiang，China [Abstract] 0bjecfive Toinvestigatetheeffectsofdifferentiationofratbonemesenchymalstem cells (rMSCs)intoneuron—likecellswithsalviamiltiorrhizainjectioninvitro．Methods rMSCswereseparated from ratbonemarrow withwallstickingmethodandexpanding，andculturedni vitro．rM SCswereinducedto differentiateintoneuron—likecellswithsalviamiltiorrhizainjection．Theeftte：ctsofdifferentdosagesofsalvia miltiorrhizaondifferentiationofrMS；Csintoneuron．dikecellsweleobserved．Neuron．-likecellswere】identified with neuron—specificenolase (NeuN)，neurofilament (NF —M )，gl