枸杞多糖诱导大鼠骨髓间充质细胞向神经元样细胞转化的实验研究.pdfVIP

维普资讯 华北煤炭医学院学报 2006年5月第8卷第3期 JNoahChinaCoalMedicalCollege2006May,8(3) 枸杞多糖诱导大鼠骨髓问 充质细胞向神经元样细胞转化的实验研究 刘树辉 马云胜 曹中伟 秦书俭 郑德宇 (锦州医学院解剖学教研室 辽宁锦州 121001) [摘 要] ① 目的 探讨枸杞多糖谤导骨髓间充质细胞(BMSCs)向神经细胞转化的可能机制。②方法 用贴壁筛选法分离培养出 贴壁生长良好的骨髓 BMSCs。选取第3代细胞，当传代细胞长满瓶底的80％以上时，先用含 15％FBS和 1g／L枸杞多糖的DMEM培 养基预诱导24小时，然后，用不舍血清的1 L枸杞多糖的I)MEM培养基诱导。光镜下观察细胞形态；用免疫组化技术检测细胞Nes— tin、NF、GFAP的表达。⑧结果 预诱导后，BMSCs没有变化。而经过枸杞多糖诱导后，细胞在4小时后即出现形态学上的改变，细胞 变凸，立体感增强，从胞体伸出突起。免疫组化检测显示，细胞Nestin、NF染色阳性，GFAP阴性。④结论 骨髓间充质细胞经过枸杞 多糖的诱导可以转化为神经细胞 [关键词] 骨髓间充质细胞 枸杞多糖 神经细胞 [中图分类号] 32928 [文献标识码] A [文章编号] 1008—6633(2006)03—0281—03 Experimentalstudyontransformationofratbonemarrow mesenchymalstem ceilsintoneuron—likecensinducedby Lydumbarbarum polysaccharide Shuhui，MAYunsheng，CAOZhongwei，etal(DepartmentofAnatomy，Jinzhou MedicalCollege．Jinzhou121001，China) [ABsTRACT] 0bjective Tostudythepossibilitythatlyciumbarbarumpolysaccharide(LBP)induceddifferentiationof aduhratboBemarrowmesenehymalstemcells(BMSCs)intoneurons．Methods BMSCsfrom aduhratwereisolatedandcu1． tured．ThenBMSCswereinducedbylycium barbarum polysacchafidein serum —freemedium fordifferentperlod．BMSCs werepretreatedwithpreinductionmedium consistingofDMEM 15％ ，FCS1 L，LBPofr24houm，theninducedwithindue． t／onmedium consistingofDMEM 1 LandLBP． emorphologicalchangesofthecellswereobservedunderphasecontrast microscope．rrheneuronalspecificmarkers，neurofilement(NF)，nestin，andgliallfibriUaryacaidicprotein(GFAP)weree— valuatedbyindirectimmunocyto—chemistrystaining．Results Afterinductionfor4hours ．someshowedmoprhologicalchan． gesobverously．Twenty—fourhours later．thedifferentiatedcellsshowedtypoalneuronal moprhology． eexpressionofNF andnestinwaspositivebutGFAPwasnegative．Conelusion Lycium barbarum polysacchafid