转基因高γ-亚麻酸大豆油抗肿瘤作用的研究.pdfVIP

中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology，2005，25(7)：92～97 转基因高 ．亚麻酸大豆油抗肿瘤作用的研究 云萍卜 王光凤 陈 竺 (1上海人类基因组研究 中心 上海 201203 2上海医药工业研究院 上海 200437) 摘要 7一亚麻酸(GLA)是人体和动物饮食中具有营养作用的重要的多烯不饱和脂肪酸，在大多数 油料作物种子 中不合有 GLA，而含有其前体物亚油酸。△6一脂肪酸脱氢酶可将亚油酸转化为7一亚 麻酸，为了能够在传统的油料作物大豆中产生GLA，将从深黄被孢霉 中克隆的△6一脂肪酸脱氢酶 基因，与植物表达载体 pBI121连接 ，构建了重组质粒 pBIMI6，采用农杆菌介导的大豆子叶节转化 系统 ，成功地将该基 因导入到栽培大豆吉林 47品种 中，获得一批转基 因植株。经 PCR检测和 Southern杂交分析 ，证明外源基 因已导入并整合到大豆的基 因组 中。通过气相色谱 (GC)对大豆 种子进行脂肪酸成分分析 ，结果表明，产生了GLA，其含量最高可达 36．585％。将高GLA的转基 因大豆油口服给药，结果表明，其对小鼠S180肉瘤、肝癌H22和 Ehrlich癌实体型的抑瘤率分别为 32．63％、31．91％和34．34％。其肿瘤抑制率均30％，与对照组比较有显著差异(P0．01)，表现 初步的抗肿瘤作用。 关键词 7一亚麻酸 转基 因 大豆 △6一脂肪酸脱氢酶基因 抗肿瘤 丫一亚麻酸(7一LinolenicAcid，GLA)是人体必需的 的抗肿瘤药物。 不饱和脂肪酸，一种十八碳三烯全顺式不饱和脂肪 △6一脂肪酸脱氢酶 (△6．fattyaciddesaturase，D6D) 酸，在碳链的第 6，9，12位各有 1个双键。它作为花 是GLA生物合成的限速酶，它以亚油酸为底物，在 生四烯酸、前列腺素和白三烯等生理活性物质的前 c6和c7位之间脱氢形成 GLA。国外在 8O年代末 体，对人体的激素调节及脂肪酸代谢发挥着重要的 期和9O年代初期开始进行D6D基因的克隆和表达 生理作用，尤其以它在心血管疾病、糖尿病以及癌症 工作，相继从蓝细菌¨、高山被孢霉 ¨’引、畸雌腐 方面的医疗价值而成为学术界研究的热点 “ 。体 霉 、琉璃苣 ∞l21]、线虫 、小 鼠…、斑马鱼 、红 外试验表明GLA对乳腺癌、肺癌、皮肤癌、子宫癌、卵 鳟鱼 等不同物种中克隆了△6一脂肪酸脱氢酶基 巢癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌、胶质母细胞 因，分别在啤酒酵母、烟草和油菜中进行 了表达。 瘤和肝癌细胞等有明显的抑制作用 。在体内试 本试验采用农杆菌介导的转化方法，将来源于 验中可抑制二甲基苯并蒽(2，4．DimethylbenzoicAcid， 深黄被孢霉 (M．isabeUina)的 D6D基 因(GenBank DMBA)激发的、12—0．十四酰佛波．13一乙酸酯 (12—0一 号为 AF3O6634) 转入大豆中，获得了一批转化植 tetradecanoy1．phorbo1．13．acetate，TPA)促进的小鼠皮肤 株。经气相色谱分析转基因大豆脂肪酸的组成，从 乳头状瘤的发生 J，以及 DMBA诱导的大鼠乳腺癌 中筛选出高产 GLA的转基因大豆。采用小 鼠S180 的发生 ¨引，并可抑制 Walker256肝癌大 鼠的肿瘤生 肉瘤 、肝癌 H22实体型、Ehrlich癌实体型 (ESC)模 长n 。I}缶床脑内局部注射可抑制患者恶性神经胶质 型对高GLA转基因大豆油提取样本进行体 内抗肿 瘤的生长并延长生存时间，而且对正常组织没有影 瘤效果初步研究。 响n 。与他莫昔芬合用治疗内分泌敏感肿瘤如乳 1 材料和方法 腺癌，I临床反应比他莫昔芬单用显著，患者可良好耐 受n]。研究者认为 亚麻酸可能会发展成一种安全