用于大豆转基因检测的DNA.pdfVIP

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2012-03-27 用于大豆转基因检测的 DNA 提取方法的 比较研究 1 1,2 2 3 1 2 1 刘欣 ,祝长青 ,王毅谦 ,沈贇 ,黄明 *,蒋原 ,周光宏 (1. 南京农业大学食品科技学院/ 国家肉品质量安全控制工程技术研究中心,江苏 南京,210095 ; 2.江苏出入境检验检疫局,江苏 南京,210001 ; 3.江苏疾病预防控制中心,江苏 南京,210009 ) 摘 要:为筛选出用于大豆 DNA 提取的适宜方法,分别使用 Bayer 方法、DuPont 方法、Monsanto 方法、Qiagen 和 Tiangen 试剂盒法提取大豆子粒 DNA ,并通过紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳与实时荧光 PCR 检测 DNA 质量。 结果显示:Bayer 方法提取的 DNA 含有较多杂质,抑制实时荧光 PCR ;Monsanto 方法提取的 DNA 纯度差且得率低, 不符合检测要求;DuPont 方法、Qiagen 试剂盒法与 Tiangen 试剂盒法能提取到纯度好、得率高、完整性好的 DNA , 符合实时荧光 PCR 方法的要求,但是 Qiagen 试剂盒法成本过高。因此,DuPont 方法与 Tiangen 试剂盒法适用于转基 因检测的大豆DNA 提取。 关键词:大豆;DNA 提取;转基因生物;琼脂糖凝胶电泳;实时荧光 PCR 中图分类号:S565.1 文献标识码:A Comparison of Methods for DNA Extraction from Soybean for Detection of Genetically Modified Organism 1 1,2 2 3 1 2 1 LIU Xin , ZHU Chang-qing , Wang Yi-qian , SHEN Yun , HUANG Ming *, JIANG Yuan ,Zhou Guang-hong (1. College of Food Science and Technology, National Meat Quality and Safety Control Center, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China; 2. Jiangsu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Nanjing 210001, China; 3. Jiangsu Provincial Center for Disease Prevention and Control,Nanjing 210009, China) Abstract :The objective of this study was to screen a suitable method for DNA extraction from soybean by comparison of five generally applied DNA extraction methods. After extraction, the quality of soybean DNA was examined with ultraviolet spectrophotometry, agarose gel electrophoresis and real-time fluorescent PCR, respectively. The results showed that the DNA extracted by Bayer method contained many PCR inhibito

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