BHC80基因抑制对斑马鱼胚胎红细胞发育的影响.pdfVIP

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2009, 36(11): 1469~ 1474 BHC80 因抑制对斑马鱼胚胎 红细胞发育的影响 嘉云 蒋 张 洁 谭 理 宋后燕* (复旦大学分子医学教育部重点实验室，上海200032) 摘要 胚胎整体RNA 原位杂交显示，BH C80 基因表达主要集中在中枢神经系统部位 应用吗啡啉修饰的反义寡核苷酸技术 抑制BH C80 基因表达，显示胚胎红细胞减少并堆积在PBI 区，用胚胎期红细胞标志茁 e3 globin 以及造血过程中的重要转录 因子 、 - 、 的胚胎整体RNA 原位杂交实验显示， 基因表达下调使 标记胚胎红系前体细胞增殖增 gata1 c myb lmo2 BH C80 gata1 多并且分化延迟，导致红细胞减少和PBI 区红细胞堆积 血管内皮标志基因 - 的RNA 探针原位杂交和荧光显微造影显示， f lk 1 BH C80 基因表达下调组血管与对照组相比清晰可见无明显差异 关键词 斑马鱼，BH C80，红细胞发育，整体原位杂交 学科分类号 Q3 ，Q7 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2009.00301 BHC 80 是组蛋白去乙酰基酶 合物(histone 功能，而斑马鱼体型较小，可通过渗透作用提供氧 deacetylase complex，BHC) 的一个约80 ku 的组分， 气和营养，即使心血 和造血系统严重障碍也可以 BHC 合物参与非神经细胞中神经特异性基因的转 存活较长时间，斑马鱼造血相关转录因子与哺乳动 录抑制，使靶基因启动子从转录活化状态向转录抑 物具有高度的同源性，而斑马鱼胚胎有在母体外发 制状态转变，该过程包括组蛋白赖氨酸H3K9 去乙 育、胚胎透明、便于实时观察血细胞发育的全过程 酰化、H3K4 去甲基化和H3K9 甲基化 BHC80含 等优势，特别适合于胚胎缺血的研究[5, 6] 有三种结构域：亮氨酸拉链结构域(leucine zipper 血细胞发育是一个极其复杂的过程，脊椎动物 domains)、AT 钩状结构域 (AT hook domain) 和 有两次胚胎造血：原始造血和定向造血，两次造血 PHD 结构域 (plant homeodomain /leukemia-associated 的转换伴随着造血解剖位置的改变 斑马鱼原始造 protein domain) BHC 80 的PHD 结构域能够结合 血中的原始造血细胞不经过多能祖细胞阶段而直接 BHC 合物的其他组分而成为该 合物的骨架蛋 成为成熟的血细胞，原始造血发生在两个区域：第 [1] 白，组织BHC 合物的转录抑制功能 组蛋白甲 一个区域位于胚胎前部的侧板中胚层；第二个区域 基化是一个动态调节过程，甲基化酶和去甲基化酶 在脊索和躯干中胚层 间，称为中间细胞群 在不同条件下可以结合同一个靶基因启动子[2] (intermediate cell mass，ICM) 原始巨噬细胞是第 BHC80通过PHD 结构域结合H3K4me 1/2 去甲基后 一个出现的造血细胞，起源于斑马鱼胚胎前部的侧 的 物H3K4me0，帮助维持组蛋白赖氨酸特异性 板中胚层，然后迁移到卵黄囊，最后在受精后18 h 去甲基酶 1(lysine specific demethy