靶向同源盒基因A7的小干扰RNA筛选及功能鉴定.pdfVIP

·581· 壁疸堑窒量!堕座!Q!!生!旦筮垄鲞箜!塑鱼塑!望曼望!!竺!垫!堡!i!i!!!!P塑些竺!Q!!!y尘：堑!盟!：! ·论著· 靶向同源盒基因A7的小干扰RNA筛选 及功能鉴定 尹宝慧 贾秀红李建厂 李有杰 【摘要】 目的体外设计、合成及筛选高效沉默同源盒基因A7(HOXA7)表达的小干扰RNA (siRNA)，并研究沉默HOXA7对人类肺腺癌细胞株LETP．a．2增殖、凋亡的影响。方法设计、合成三对 体介导转染LEllP—a一2细胞。实验分6组：细胞对照组、脂质体对照组、siRNAnc组、siRNAl组、siRNA2组、 siRNA 3组，反转录聚合酶链反应(RT．PCR)和Westernblot分别检测各组HOXA7mRNA和蛋白表达情 况，四甲基偶氮唑蓝(M，ITI’)比色法和流式细胞术分别检测沉默HOXA7后LETP．a．2细胞增殖、凋亡情 况。结果siRNA成功转染LETP．a．2细胞，三对siRNA均能有效沉默HOXA7表达，其中以siRNA2沉默 HOXA7的效果最佳，在mRNA和蛋白水平沉默率分别为(57．344±4．743)％和(52．2194-0．550)％；三对 h siRNA沉默HOXA7后均能抑制LETP．a．2细胞增殖并促进其凋亡，其中以siRNA2组效果最明显，48 细胞增殖抑制率可达(48．144±4．992)％，凋亡率达(26．613-4-0．612)％。结论筛选出高效沉默 HOXA7的siRNA2能有效抑制LETP．a．2细胞增殖并促进其凋亡，提示HOXA7可能成为肿瘤基因治疗 的新靶点。 【关键词】基因，同源盒；RNA干扰；肺腺癌LETP．a．2细胞 SelectionandfunctionalidentificationofsiRNA ofHOXA7YlN JIA targeting Bao-hui4，Xiu—hon昏 LI Pediatrics，the BinzhouMedical Jian—chang,LIYou-fie．8Departmentof AffiliatedHospitalof University, Binzhou 256603，China author：JIA CorrespondingXiu-抽，l苗Email：jiaxiuhon9001@163．eom To andscreensmallinterefere of 【Abstract】Objectivedesign RNA(siRNA)targetingHOXA7，and to theeffectofthesiRNAonhumancancerU￡7IP-a-2cells and in investigate lung proliferationapoptosis of for were vitro．MethodsThree ofsiRNA HOXA7andone ofsiRNA control pairs targeting pair negative transfected intoLETP—a一2cells cationic mRNAand respectively through liposome．Theproteionexpression blot levelsofHOXA7wereobservedr