Hsa miR7慢病毒表达载体的构建及其在人卵巢癌细胞HO8910PM中表达的有效性.pdfVIP

Plan，March2013，V01．32，No．2 国际生殖健康／计划生育杂志2013年3月第32卷第2期JIntReprodHealth／Faro ·87· ·论著· Hsa miR一7慢病毒表达载体的构建及其在人卵巢癌细胞 H08910-PM中表达的有效性。 王文文邱丽华△ 7 【摘要】 目的：构建HsamiR一7的慢病毒表达载体，感染人卵巢癌细胞H08910一PM后检测微／bRNA (miR一7)及其靶基因血管内皮生长因子受体(EGFR)的表达，为研究miR一7在H08910一PM中的生物学功能 奠定基础。方法：将聚合酶链反应(PCR)扩增得到的miR一7前体序ylJpre—miR一7和慢病毒载体pLVX—IRES— blot)方法检测其靶基因EGFR的表达。结果：酶切及测 miR一7和miR一7的表达，qPCR及蛋白质印迹(Western 序结果示慢病毒表达载体pLVX—miR一7一IRES—ZsGreenl构建正确，病毒浓缩液感染H08910一PM后能有效提 ZsGreenl慢病毒表达载体及稳定表达miR一7的H08910一PM细胞亚系。 【关键词】微／J、RNAs；慢病毒属；卵巢肿瘤；受体，血管内皮生长因子 lisa Constructionofthe miR-7Lentiviral Vectorandits inHnlnan0varian Expression Expression CancerCellLineH08910-PM形AⅣG Obstetricsand Wen—wen，QIULi—hua．Departmentof Gynecology． School 200127，China Re面iHospital，ShanghaiJiaotongUniversityofMedicine，Shanghai Correspondingauthor：QIULi—hua．E—mail：filyqiulh@126．con constructtheHsamiR一7lentiviral todetectitseffectivenessin 【Abstract】 vector，and objective：To humanovariancancercellline iSthe H08910一PM．ItbasesoffunctionalofHsamiR一7inovariancancer． study Methods：HsamiR一7was fromthe DNAandinsertedinto vector amplified genomic pLVX—IRES—ZsGreenl afterdouble to vector．ThevectorwasthenconfirmedPCR digestiongenerate pLVX—miR7一IRES—ZsGreenl by andDNA wasinfectedthe concentratedlentivirus293T sequencing．H08910一PMby