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一、实验原理 生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。 3.蛋白质+双缩脲试剂―→紫色 二、实验流程图示 先根据选材预测实验结果,然后再实验验证,因此本实验属验证性实验。 1.还原糖的检测和观察 结论:还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有还原糖。 注:溶液颜色的变化过程为浅蓝色―→棕色―→砖红色 2.脂肪的检测和观察 方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色 方法二: 3.蛋白质的检测和观察 选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液 结论:说明组织样液中存在蛋白质 4.淀粉的检测和观察 实验注意问题 1.实验材料的选择 (1)还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,易于观察。可选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等,但不能选用甜菜、甘蔗,因为它们所含的蔗糖是一种非还原糖;马铃薯因含淀粉较多也不能做实验材料;不能选西瓜、血液(含葡萄糖)、含还原糖的绿色叶片等做实验材料,以避免颜色的干扰。 (2)脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选富含脂肪的花生种子。 (3)蛋白质的鉴定实验中,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋的蛋清。 2.做鉴定蛋白质的实验时,在鉴定之前,可以留出一部分样液,以便与鉴定时样液的颜色变化作对照,这样可以增强说服力。 3.蛋白质要稀释主要是防止蛋白质与双缩脲反应后黏固在试管内壁上,使反应不彻底,也不易刷洗试管。 【辨析比较】 斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析 比较项目 斐林试剂 双缩脲试剂 不 同 点 使用方法 甲液和乙液混合均匀后方可使用,且现配现用 使用时先加A液再加B液 呈色反 应条件 需水浴加热 不需加热即可反应 反应原理 还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被还原为Cu2O 具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物 颜色 砖红色 紫色 浓度 乙液CuSO4溶液浓度为0.05 g/mL B液CuSO4溶液浓度为0.01 g/mL 相同点 都含有NaOH溶液、CuSO4溶液两种成分,且所用NaOH溶液浓度都是0.1 g/mL 双缩脲是一种物质,其结构式为: 因其结构含有肽键,所以在碱性环境中与Cu2+反应生成紫色络合物。因此把与其反应的NaOH溶液和CuSO4溶液称为双缩脲试剂。 应用指南:该实验原理、方法、步骤可用于对生物组织、消化液(如唾液)、食品(如奶粉)进行某种成分的检测或鉴定,也可用于医学上某些疾病的诊断,如糖尿病、肾炎等。 [2012·湖南郴州质量检测I]红薯和土豆都富含淀粉,但红薯吃起来比土豆甜。为探究其原因,某兴趣小组在温度不同、其他条件相同的情况下对处于休眠期的红薯块根与土豆块茎处理30 min后测定还原糖的含量。结果如图: (1)由图中曲线可知,60℃时红薯还原糖含量最高,原因是______________________________________。 (2)与红薯相比土豆不含还原糖的可能原因是 _________。 (3)为了确定土豆中不含还原糖的原因,请完成以下实验: 实验原理: ①淀粉能被淀粉酶水解为还原糖; ② ___________________________________________。 去掉淀粉与还原糖的红薯提取液,去掉淀粉的土豆提取液,双缩脲试剂A液,双缩脲试剂B液,斐林试剂甲液,斐林试剂乙液,苏丹红染液,质量分数为3%的淀粉溶液,质量分数为3%的蔗糖溶液等。 实验步骤: 第一步:取A、B两支试管,在A试管中加入去掉淀粉的土豆提取液2 mL,B试管中加入去掉淀粉和还原糖的红薯提取液2 mL。________水浴保温5 min。 第二步:向A、B两支试管中各加入等量的水浴加温至60℃的________溶液,水浴保温5 min。 第三步:将______________________________________后,向A、B试管内各加入2 mL。然后,_________________。最可能的实验结果:______________________。 (4)食用土豆时,消化分解成的葡萄糖,几乎被小肠上皮细胞全部吸收,该吸收过程需要 ____________________。 思路点拨:(1)淀粉在淀粉酶的作用下可产生还原糖。由图分析可知,随着温度的升高,还原糖的含量变化趋势是先增后减,60℃时还原糖含量最高,说明此时淀粉酶的活性最大。(2)土豆含有大量的淀粉,但不含还原糖,最可能的原因是缺少淀粉酶,淀粉不能水解为还原糖。 (3)此小题是简单的条件限制性实验设计。分析该实验的题目是“确定土豆中不含还原糖的原因”,可知单一变量是有无淀粉酶,根据题目所给材料,实验的自变量为土豆提取液(去淀粉
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