RNA干扰抑制ERCC1基因对肺癌细胞A549药物敏感性影响的研究.pdfVIP

中华肿瘤防治杂志 2009年 7月第 16卷第 14期 CHINJCANCERPREVTREAT，July2009，Vo1．16 No．14 《实验研究l RNA干扰抑制 ERCC1基 因对肺癌细胞 A549 药物敏感性影响的研究 潘泓， 左传 田， 李力， 茅乃权 ， 张纬 ， 唐步坚 广西医科大学附属肿瘤 医院胸 外科 ，广西 南宁 530021 EffectsofinhibitionofERCC1expressionbyRNA interferenceonchemotherapy sensitivityoflungcancerA549cellIine PANHong，ZUOChuan—tian，LILi，MAONaiquan，ZHANGWei，TANGBu—Jian DepartmentofThoracic，TumorAfJiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity，Nanning530021，P．R．China 【摘要】 目的 ：用 RNA 干扰技 术 下调肺 癌 ~ABSTRACT] OBJECTIVE：TostudytheinhibitionofERCC1 细胞 系A549切 除修 复 交叉 互补 基 因(ER— expressionbyRNA interferenceto improvechemotherapysensitiv CC1)的表达 ，以提 高肺癌细胞对化 学药物 ityoflungcancerA549cellline．METHODS：Thesmallinterference 的敏感性 。方法 ：首 先构 建针 对 ERCC1基 RNA (siRNA)ofERCC1expression vectorwasestablished．The 因的SiRNA 真核表 达 载体 ；其 次将 载 体 转 establishedvectorsweretransfectintolungcancercells(A549)by 染肺癌细胞 A549，采 用 RT—PCR和 蛋 白质 theliposometransfection reagent． RT PCR andW esternblotting 印迹法技术证 实转染细胞 中ERCC1基 因沉 wereusedtoconfirm whetherthesiRNA silencedtheexpressionof 默效果 良好 ；最后采用 MTT法检测构建真 ERCC1in A549 cells．Thecharacteristicsofdrug resistancein 核表达载体转染细胞对顺铂药物毒 副反应 transfectioncellsweremeasuredbyM TT assay．RESULTS：siRNA 的影响 。结果 ：成功构建针对 ERCC1基 因 of ERCC1 expression vector was constructed successfully． 的siRNA真核表 达载 体 ；将 其转 染肺癌 细 RT—PCR andW esternblottingassayshowed thattheexpression of 胞 A549，可 以抑制细胞 中ERCc1基 因表 ERCC1intransfectedA549cellswassignificantly lowerthanthat 达 ，转染细胞较亲本细胞 ERCC1基 因表达 inA549cellsby48．3 ，P 0．05．ThevaluesofIC50ofA549 降低 48．3 ，P 0．05；RNA 干 扰 的 A549 cellstochemotherapy drugs(DDP)were2．93 timeshigherthan 细胞较 亲本 细 胞 对顺 铂 的敏 感 性 升 高 了 A549／vectercells．CONCLUSIONS：TheRNA interferencetoER— 2．93倍 。结论 ：RNA 干扰是 一种