不同质量浓度氨氮对轮叶黑藻和穗花狐尾藻抗氧化酶系统的影响.docVIP

不同质量浓度氨氮对轮叶黑藻和穗花狐尾藻 抗氧化酶系统的影响 金相灿1*，郭俊秀1.2，许秋瑾1，扈学文2 ，张瑞玖2 1. 中国环境科学研究院湖泊生态环境创新基地/国家环境保护湖泊污染控制重点实验室 北京 100012；2. 内蒙古农业大学农学院 内蒙古 呼和浩特 010018在不同质量浓度（0、0.2、1.5、2.0、4.0、8.0 mg·L-1）氨氮条件下，对沉水植物轮叶黑藻[Hydrilla Verticillata(L.f) Royle]和穗花狐尾藻[Myriophyllum　spicatum L.]的蛋白质含量、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）及过氧化物酶（POD）活性变化进行了研究。实验结果显示，当氨氮质量浓度为0.2 mg·L-1时，为轮叶黑藻的适宜生长浓度，表现为常用的膜脂过氧化指标MDA含量和SOD活性均变化比较平缓，且蛋白质含量增加，而穗花狐尾藻由酶学指标显示，氨氮质量浓度小于0.2 mg·L-1时对它的正常生理代谢产生了影响；当氨氮质量浓度在1.5~4.0 mg·L-1的范围则对轮叶黑藻产生胁迫作用，而穗花狐尾藻在此质量浓度范围能正常生长；当氨氮质量浓度为8.0 mg·L-1时，高氨氮对2种沉水植物都表现出胁迫效应，且对轮叶黑藻的胁迫作用更强。实验结果表明在进行湖泊水生植物修复时，相对于轮叶黑藻，穗花狐尾藻更适合作为生态恢复的先锋物种。 氨氮；轮叶黑藻；穗花狐尾藻；抗氧化酶活性；胁迫中图分类号：X1 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（200）0-0001-05湖泊水体污染与富营养化日趋严重，已是我国及世界各国亟待解决的环境问题之一。在大多数浅水湖泊中，沉水植物是湖泊生态系统的重要组成部分，它通过有效地增加空间生态位，抑制生物性和非生物性悬浮物，改善水下光照和溶解氧条件，为形成复杂食物链提供食物、场所和其他必需条件。因此，重建与恢复水生植被对治理湖泊富营养化，恢复水生生态系统结构和功能，以及合理利用自然资源极为重要[14]。大量研究表明，沉水植物能直接吸收利用富营养化水体中无机氮盐的氨态氮和硝态氮，但优先吸收利用氨态氮，而当植物吸收了过多的氨态氮时会产生氨害[5]。鉴于不同沉水植物对氨氮的耐受程度各异，在湖泊富营养化修复过程中筛选出较耐氨氮的沉水植物作为先锋物种具有重要的意义。 本研究选取轮叶黑藻[Hydrilla Verticillata(L.f) Royle]和穗花狐尾藻[Myriophyllum spicatum L.]为实验材料。实验研究了不同氨氮质量浓度对沉水植物轮叶黑藻和穗花狐尾藻蛋白质含量、丙二醛含量（MDA）、以及过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性变化的影响，试图比较两种沉水植物对氨氮质量浓度变化的适应性，为富营养化湖泊的沉水植物修复选择先锋物种提供理论依据。 轮叶黑藻和穗花狐尾藻均取自北京房山区拒马河。取回后在温室预培养1个月，选取生长良好、长势一致的顶枝做试验材料。 营养液采用改良的1/10倍的Hoagland’s 溶液，氨氮质量浓度按不同的实验组配成0、0.2、1.5、2.0、4.0、8.0 mg?L-1，磷质量浓度为0.02 mg·L-1。 选取生长良好、形状、量较为一致的长15 cm的穗花狐尾藻顶枝和长18 cm的轮叶黑藻顶枝，分别移栽到装满石英砂的培养杯中，每个培养杯中扦插4株长势一致的植物顶枝作为平行样。培养杯置于10 L无色玻璃缸(20 cm×20 cm×30 cm)中，每缸放培养杯5个，营养液8.5 L。每种植物分别栽种到个玻璃缸中，个玻璃缸营养液的氨态氮质量浓度设置成个不同水平：0、0.2、1.5、2.0、4.0、8.0 mg·L-1，分别以ρ1、ρ2、ρ3、ρ4、ρ5、ρ6表示。培养缸置于1.5 m×0.6 m×0.4 m的温控培养箱中，白天温度为25 ℃，晚上温度为20 ℃，光照强度为3000 x，光暗比为1410 h，湿度为70%。实验进行28，每隔3换一次营养液。每隔7取一次样用于生理生化指标的测定。 酶液提取及测定：称取植株0.3 g放入研钵中，加0.05 mol·L-1磷酸缓冲液(pH=7.8)6 mL冰浴研磨，4 ℃下15000 r·min-1离心15 min，上清液即酶提取液。蛋白质含量的测定[6]：采用考马斯亮蓝G-250法测定，单位mg·g-1。超氧化物歧化酶(SOD)活性[7]测定：以抑制氮蓝四唑(NBT)光化还原50%的酶量为1个活力单位(U)，活性用U·mg-1(蛋白)表示过氧化物酶(POD)活性[6]采用愈创木酚氧化法，记录470 nmOD降低速度，用ΔOD470·min-1·g-1(蛋白)表示。MDA含量的测定[8]：采用硫代巴比妥酸法测定，单位mmol·mg