感受态细胞制备和质粒转化冰浴时间对大肠埃希菌转化效率的影响.pdfVIP

第39卷 第3期 江汉大学学报 (自然科学版) Vo1．39 No．3 2011年9月 J．JianghanUniv．(Nat．Sci．Ed．) Sep．2011 感受态细胞制备和质粒转化冰浴时问 对大肠埃希菌转化效率的影响 罗 锋，余 腾，范丽梅 (江汉大学 医学院，湖北 武汉 430056) 摘 要：通过研究转化实验中加入质粒 DNA 的量、大肠埃希菌感受态细胞制备和质粒转化过程 中冰 置时间长短对感受态细胞最终转化效率的影响，分析其最佳转化效率参数，优化感受态制备和转化方法． 结果表明，加入质粒 (pBR322)DNA量为 1～10ng，感受态制备过程中菌液冰浴时间在 3O～60rain，以及 感受态细胞加入质粒DNA并混匀后的冰置时间为 30min和 120min时，其转化效率达到最高，在此范围 之外，感受态的转化效率下降．本研究结果可为有高转化率要求的克隆转化实验提供有用的技术基础． 关键