人Wnt10b基因真核表达载体的构建及表达鉴定.pdfVIP

第24卷 第4期 汕头大学医学院学报 2011 h。nl ：二．二．-l _d = ．24 No．4 2ol1 人 WntlOb基因真核表达载体的构建及表达鉴定 纪影畅¨，蔡湘娜¨，林常敏2)，李宇’ (1汕头大学医学院第一附属医院整形外科 ；2汕头大学医学院组织学与胚胎学教研室，广东 汕头 SlSO~1) [摘要]目的：利用基因工程技术构建人 WntlOb基因的pEGFP-N1．Wnt10b真核表达载体，观察其在 COS-7细胞中的表达。 方法：以pUC19-Wntl0b为模板，PCR扩增人 WntlOb基因的cDNA编码区序列，扩增产物和pF_．CFP-NI载体双酶切。T4DNA 连接酶连接，构建pEGFP-NI-Wntl0b，酶切和测序鉴定该载体；LipofectaIrIiIl 将该载体转染入 c0孓7中，Westernblot和免