白腐真菌总RNA提取方法的研究.pdfVIP

第29卷第6期 生 物 学 杂 志 Vo1．29 No．6 2012年 12月 J0URNAL0FB10L0GY Dee．2012 doi：10．3969／j．issn．2095—1736．2012．06．090 白腐真菌总 RNA提取方法的研究 甘 露，荚 荣，陈凌波 (安徽大学生命科学学院，合肥230039) 摘 要：为寻求一种简便有效的白腐真菌总RNA的提取方法，在实验中分别采用Trizol试剂盒法、CTAB—LiC1法、硅 藻土一STE法进行操作，琼脂糖凝胶 电泳和紫外吸收光谱检测提取的RNA。通过对提取的总RNA实验操作过程、浓 度、纯度以及完整性等方面的比较与分析，得 出硅藻土一STE法是白腐真菌总RNA提取的理想方法。 关键词：白腐真菌；总RNA；Trizol试剂盒法；CTAB—LiC1法；硅藻土一STE法 中图分类号：Q522 文献标识码 ：B 文章编号：2095—1736(2012)06—0090—03 ThestudyoftotalRNA extractionmethodsfrom white—rotfungi GAN Lu，JIA Rong，CHEN Ling—bo (SchoolofLifeScience，AnhuiUniversity，Hefei230039，China) Abstract：InordertoseekaneffectivemethodofextractingtotalRNAfrom white-rotfungi，methodsliketrizolKitextraction，CTAB— IiC1extractionandDiatomite—STEextractionwereusedandthecontentofextractedRNA weredetectedwithagarosegelelectrophoresis anduhravioletabsorptionspecturm．ResultsshowedDiatomite—STEextractionwasthegoodwayofextractingtotalRNA from white—rot fungiamongthoseprocessesbasedonthecomparisonandanalysisoftheconcentration，purityoftheextractedRNA． Keywords：white—rotfungi；totalRNA；trizolKitextraction；CTAB—LiC1extraction；diatomite—STEextraction 白腐真菌多属担子菌纲 (Basidiomycetes)，寄生或 试剂盒法、CTAB—LiC1法 、硅藻土一STE法3种方法进行 腐生在树术或木材上，能降解木质素 、纤维素，它是整 总RNA的提取，并对此 3种方法进行了相应的比较 、 个碳素循环的中心 ，是一类能在纯系培养中将木质素 改进和优化 ，以期得到一种既方便 、快速又能得到高质 彻底矿化的微生物 。。。它对各种有毒害、难降解的 量总 RNA的方法。 化合物具有广谱 、低耗、适应性强 的生物降解 能 1 材料与方法 力 。，引发了国内外许多学者对与其降解活动相关 1．1 实验菌株 的生物学、生物化学及分子生物学等方面进行深人研 裂摺菌F17(Schizophyllumsp．F17)由本实验室筛 究 从细胞中分离纯净 、完整的 RNA分子是探索 选并保存。 白腐真菌生物学机制和对其进行能动改造的基础和前 1．2 主要试剂 提，提取的RNA质量也直接影响后续的研究工作