离子交换树脂法纯化水溶性红曲红色素的研究.pdf

第 31卷第9期 西 南 大 学 学 报 (自然科学版) 2009年 9月 Vo1．31 No．9 JournalofSouthwestUniversity(NaturalScienceEdition) Sep． 2009 文章编号：1673—9868l2009)O9—0020—05 离子交换树脂法纯化水溶性红曲红色素的研究 熊何健 。， 吴云辉 ， 甘纯玑。， ~问--k-文杰 ，。 1．集美大学 生物工程学 院，厦 门 361021；2．厦 门海洋职业技术学 院 生物技术系 ，厦门 361012； 3．福建农林大学 食 品科学学院，福州 350002 摘要：以弱碱性 阴离子交换树脂D301吸 附水溶性红 曲色素溶液，95 乙醇洗脱 ，然后进行 HPLC分析 ，结果表 明，红 曲色素含有8种黄色素组份，其最大吸收峰均在 380nm 附近 ；弱碱性阴离子交换树脂D301可实现红色素与 黄色素组份 的有效分离． 关 键 词 ：离子 交换树脂 ；纯化 ；红曲色素 中图分类号 ：TS202．3 文献标识码 ：A 红曲是以大米为原料，经红曲菌代谢而成 的一种醇溶性色素．其主要成分是红 曲红素和红斑素 ，它们 难溶于水，易溶于乙醇H ．因此 ，现代生产一般采用碱解法将红曲红素和红斑素转化为水溶性的衍生物 ， 以制取水溶性红曲红色素 ．由于红曲菌代谢的复杂性 ，目前使用的水溶性红曲红色素除了2种主要成 分水溶性红曲红素和水溶性红斑素外，还含有 由红曲菌天然代谢产生的水溶性黄色素组份．这些黄色素组 份在外界环境条件影响下 ，易与其它物质发生反应 ，产生沉淀、变色等现象 ，使水溶性红曲红色素的应用 范围受到限制 ¨ ．本文在总结前期研究成果的基础上 ，采用弱碱性阴离子交换树脂 D3Ol对水溶性红曲红 色素进行纯化研究，获得了纯红色组份的红曲色素，为红曲色素深入研究开发奠定了基础． 1 材料与方法 1．1 材料与仪器 1)水溶性红曲红色素，南平森发天然色素有限公司，食品级； 2)弱碱性阴离子交换树脂D301，上海华震科技有限公司 ； 3)UV110o紫外——可见分光光度计 ，北京科学仪器有限公司； 4)Waters2695高效液相色谱仪 (2696PDA检测器)，美国Waters仪器公司 ； 5)玻璃层析柱． 1．2 实验方法 1．2．1 红 曲色素各组分色价的测定 红曲色素的组份主要由红色素和黄色素两类组成 ，其主要吸收峰分别为 380nm、480nm左右．因此参 照GB15961-1995分别在 380nm、480nm处测定吸光度以计算各组份的色价． 收稿 日期 ：2008—11一O3 基金项 目：福建省重大科技项 目资助课题(2003Yo08)． 作者简介 ：熊何健 (1968一)，男 ，江西东乡人 ，副研究员 ，博 士研究生 ，主要从事天然产物 的研究 通讯作者 ：简文杰 ，助教 ，硕士． 第9期 熊何健，等：离子交换树脂法纯化水溶性红曲红色素的研究 21 1．2．2 树 脂 的预 处 理 将准备装柱使用的新树脂 ，先用30~40℃热水反复清洗．开始浸洗时 ，每隔 15rnhl换水一次 ，浸洗时 需不断搅动，换水 4～5次后，每隔30rain换水一次，总共换水 4～5次，浸洗 浸洗水不带褐色．然后再 按 以下步骤用酸碱处理． 1)用 lmol／LNaOH缓慢流过树脂，用量约为树脂体积的3～5倍 ，每小时 1．5倍床层体积流过； 2)用水冲洗 ．洗至出水 pH为 11左右； 3)用 lmol／L盐酸流过树脂 ，用量及流速与 1相 同； 4)用水冲洗至出水 pH 为 4左右； 5)用 1mol／LNaOH将树脂转成OH一型 ，用量为树脂体积的 3～5倍 ，流速与 1相同； 6)碱流完后 ，用去离子水冲洗至出水 pH为 8～10，即可投入使用． 1．2．3 利用树脂吸附分 离红 曲色素 称取 10．0g红曲色素粉末 ，溶解于 150mL去离子水，加入 2Og预处理过的树脂，待吸附饱和后 ；将 树脂及色素溶液移入布氏漏斗，在真空泵上抽滤分离，并收集色素母液；随后将树脂装入玻璃层析柱，用