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生物技术通报
·研究报告 · 2006年增刊
B IO TECHN OLO G Y BULL E T IN
AFL P分子标记技术的改进
刘平武 李赟 蔡强 宋传宇 何庆彪 杨光圣
(华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室 , 国家油菜改良武汉分中心 ,武汉 430070)
摘 要 : 对 A FL P技术的限制性内切酶组合进行了改进 。以两个低频酶组合代替传统的高频酶与低频酶组
( ) (
合进行分子标记筛选 ,结果表明 ,采用低频酶组合 E coR Ⅰ+ Ps t Ⅰ产生的条带比传统酶切组合 E coR Ⅰ+M se Ⅰ和
)
Ps t Ⅰ+M se Ⅰ要少且分布不均匀 ,多集中在 150 ~800bp 之间 ,条带信号强度要大 ,多态性明显得到提高 ,分子标记
筛选成功率也得到了提高 ,而且其成本更低的特点有利于 A FL P技术在我国的进一步推广普及 。
关键词 : A FL P分子标记 限制性内切酶组合 改进
Improvem en t of Amplif ied Fragm ent L ength
Polym orph ism ( AFL P) Techn ique
L iu P ingwu L i Yun Cai Q iang Song Chuanyu H e Q ingb iao Yang Guangsheng
(N a tiona l Key L abora tory of C rop Genetic Imp rovem en t,
H uazhong A g ricu ltu ra l Un ivers ity, R esea rch
Cen ter of N a tiona l R ap eseed Imp rovem en t, W uhan 430070)
Ab s tra c t: In th is study, A FL P ( amp lified fragm ent length polymorph ism ) was imp roved on the comb ination of re
( )
striction enzym es by u sing two average cutting frequency restriction enzym e s E coR Ⅰ+ Ps t Ⅰ to take p lace the com b ina
tion of an average cu tting frequency and a h igher cu tting frequency re striction enzym e ( E coR I +M seI and Ps t I +M se I) in a
single dige s
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