1株蛹虫草的液体发酵试验及蛹虫草多糖的提取.pdfVIP

第 35卷第 4期 辽宁师范大学学报 (自然科学版) Vo1．35 NO．4 2012年 12月 JournalofLiaoningNormalUniversity (NaturalScienceEdition) Dec． 2O12 文章编号 ：1000—1735(2012)04-0534—04 1株蛹虫草的液体发酵试验及蛹虫草多糖的提取 戴 群 。， 仇玲玲 ， 杨启银 ， 陈双林 (1．江苏教育学院 生命科学与化学学院，江苏 南京 210013； 2．南京师范大学 生命科学学院，江苏 南京 210046) 摘 要 ：冬虫夏草是一种名贵的强壮滋补 中药，但 由于其严格的寄生性和特殊的生长地 理环境 ，天然虫草资源越来越少 ，冬虫夏草的开发利用只有走人工培养之路．经研 究蛹虫 草的培养时间与菌丝体生产量的关系，虫草多糖的提取以及虫草多糖 的测定，结果显示 培养 6d的菌丝产量最高，发酵时间对菌丝生长量 的研究有重要意义 ，它可 以控制大规 模发酵生产大周期．多糖含量 的测定用硫酸一苯酚法．经实验显示2次浸提 比1次浸提的 得率要高 ，摇瓶菌丝体 的粗多糖得率为 25．0％，精多糖得率为 1O．15 ，均比已报道的虫 草多糖得率高，这为人工控制大规模发酵生产大周期提供科学依据． 关键词：蛹虫草 ；液体发酵；多糖 ；提取工艺 中图分类号：TQ920．1 文献标识码 ：A 冬虫夏草 (Cordycepssinensis)属于子囊菌纲 (Ascomycetes)，肉座菌 目(Hypocreales)，麦角菌科 (Clavicipitaceue)，虫草属 (Cordyceps)，是一种名贵的强壮滋补 中药．它药性作用温和，比其他种类的 滋补品更具有镇静，止血，抗惊厥，降压，改善心肌缺血，抗血小板凝结，抗衰老，调节人体免疫的作用， 具有抗肺癌、淋巴癌和肝癌功能Ⅲ，越来越 引起 国内外药学界和生物学界研究者的重视．近来研究表 明：冬虫夏草含有大量的虫草多糖类、2O种氨基酸、腺苷、17种无机元素、维生素及其他活性物质 ，这些 活性成分对人体各系统产生广泛的有益作用．由于冬虫夏草严格 的寄生性和特殊的生长地理环境，天 然虫草资源越来越少 ，冬虫夏草的开发利用只有走人工培养的道路． 本文通过研究蛹虫草的培养时问与菌丝体生产量的关系，虫草多糖的提取方法以及虫草多糖的测 定 ，旨在为人工控制大规模发酵生产大周期提供科学依据． 1 材料 1．1 菌种 蛹虫草 (Cordcepsmilitaris(L)Link)：菌种斜面由南京师范大学生命科学学院资源微生物与菌肥 实验室保存． 1．2 培养基 培养基 I：蛋 白胨 0．51 ～1％，蔗糖 2．5％，KH PO2‰，MgSO 5‰ ；培养基 Ⅱ：米糠 2 ，麸皮 2％，玉米粉 2 ；培养基Ⅲ：玉米粉 3 ，黄豆粉 1 ，米糠 3 ，麸皮 3 ，白糖 5‰． 1．3 试剂和主要设备 (1)试剂：乙醇 (AR，上海联试化工试剂有限公司)；氯仿 (AR，上海试剂一厂)；正丁醇 (AR，上海试 收稿 日期 ：2012—09一l1 基金项 目：国家 自然科学基金项 目(3097O019) 作者简介 ：戴群(1971一)，女，江苏无锡人 ，江苏教育学院讲师，南京师范大学博士研究生． 通讯作者 ：陈双林 (1963一)，男，山东汶上人 ，南京师范大学教授 ，博士，博士生导师． 第 4期 戴 群等 ： 1株蛹虫草的液体发酵试验及蛹虫草多糖的提取 535 剂一厂)；蛋 白酶 (AR，上海试剂一厂)；苯酚(AR，上海试剂一厂)；硫酸 (AR，上海试剂一厂)等 ；(2)仪 器 ：天平 ；电子天平 (FA1O04，上海天平仪器厂)；温箱 (隔水式 电热恒温培养箱 ，上海越进医疗器械厂)； 恒温摇床(DHZ—C大容量恒温振荡器，江苏太仓市实验设备厂)；恒温热水锅 ；紫外可见分光光度计 (uV一9200)；台式冷冻离心机 (TGLL一18G，太仓市医疗器械厂)；真空干燥箱 ；旋转蒸发仪 (RE一52， 上海亚荣生化仪器厂)等． 2 实验方法 2