胶原蛋白I、胶原蛋白Ⅲ在糖尿病大鼠血管病变中的表达及中药的干预.pdfVIP

2012年12月第29卷第6期 天 津 中 医 药 Dec．20．12，Vo1．29 No．6 TianjinJourfialofTraditionalChineseMedicine 573 胶原蛋白I＼胶原蛋白m一在糖尿病 大鼠血管病变中的表达及中药的干预术 丁志明，武海阔，王 军 (天津中医药大学第一附属医院外科，天津 300193) 摘要：旧 的】对中药干预下的糖尿病大鼠动脉损伤模型的胶原蛋白的表达进行研究，为糖尿病大鼠动脉损伤纤 维病变学说和中药干预糖尿病血管并发症的可行性提供实验学依据。方【法]雄性SD大鼠48只，按随机数字表法随 机分为A一正常对照组 ，B一糖尿病对照组，C一中药治疗组，D一二甲双胍治疗组，其中B、C、D3组为糖尿病模型组，观 察各组大鼠股动脉中胶原蛋白 I、Ⅲ的含量。[结果]糖尿病模型组与正常对照组比较 ，胶原蛋白I、胶原蛋白Ⅲ均明 显升高；各治疗组治疗后与糖尿病对照组比较，胶原蛋白I、Ⅲ表达明显下降；中药治疗组与西药治疗组比较，胶原蛋 白I、Ⅲ表达下降(P0．05)。[结论】胶原蛋白I、Ⅲ在 巾、晚期糖尿病大鼠的大血管中显著增加，提示糖尿病大血管病 变可能与胶原蛋白有关；中药组方加味桃核承气汤能有效降低致纤维化因子胶原蛋白在实验性糖尿病大血管病变中 的表达，对糖尿病大血管病变有改善作用。 关键词：lI型糖尿病；大血管纤维化 ；加味桃核承气汤；胶原蛋白I；胶原蛋白Ⅲ 中图分类号：R255．4 文献标识码：A 文章编号：1672—1519(2012)06—0573—03 胶原蛋白是蛋 白质的一种，是细胞外基质(ECM) 子天平 、移液器 、干燥箱、低温冰箱、恒温水浴箱 、医 的主要成分，既往研究表明胶原蛋 白升高是导致组 用微波炉等。 织器官纤维化的重要原因之一_l】。糖尿病周围血管 1．1．4 实验试剂 SP免疫组化试剂盒、浓缩型DAB 病变中，血管纤维化可能是重要致病因素，与胶原 显色剂试剂盒、多聚赖氨酸、兔抗鼠TGF3[1多克隆 蛋白的关系较为密切，本实验 目的在于对中药干预 抗体、枸橼酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液(PBS)。 下的糖尿病大鼠动脉损伤模型的胶原蛋白的表达 1．2 实验方法 进行研究，为糖尿病大鼠动脉损伤纤维病变学说和 1．2．1 实验分组 共 48只大鼠，按照随机数字表 中药干预糖尿病血管并发症的可行性提供实验学 法随机分为：A一正常对照组 (n=12)，B一糖尿病对照 依据。 组 (n=l2)，C一中药治疗组 (n=12)，D一二甲双胍治疗 1 材料与方法 组 (n=12)。其中A组为正常血糖组 ；B、C、D3组共 1．1 实验材料 36只大鼠造糖尿病模型。 1．1．1 实验动物 雄性SD大鼠48只，清洁级，2月 1．2．2 实验干预 B、C、D组共 36只大鼠成功造模 龄，体质量200～250g。 后 ，全部予普通饲料喂养，每 日予适量长效胰岛素 1．1．2 实验药物 加味桃核承气汤(桃仁 10g，大 皮下注射，前 5周每周 2次尾静脉取血测血糖，后 黄 6g，桂枝6g，甘草3g，芒硝6g，黄芪30g，生地 7周每周 1～2次监测血糖。维持非禁食状态血糖 15g，麦门冬 12g，玄参 12g)，减压浓缩至浓度为 25mmol／L左右。 0．76gm／L，大鼠用药剂量为6．07g／(kg·d)，4℃冰箱冷 同时，A组和B组每 日1次予0．9％生理盐水 藏备用 ；盐酸二甲双胍片，研碎 ，与生理盐水配成 10mL／kg灌 胃，c组每 日1次按 10mL／kg给予中 0．1％的溶液，大鼠用药剂量为0．14g／(kgd·)，相当于 药灌 胃，D组每Et1次予二甲双胍0．14g／kg溶于 人的等效剂量；精蛋白锌胰岛素注射液；生理盐水。