HPV16E6／E7融合基因真核表达载体的构建.pdfVIP

第 35卷 第 12期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Vo1．35 No．12 2O12年 12月 JournalofXinjiangMedicalUniversity Dec．2012 · 民族肿瘤学 · HPV16E6／E7融合基因真核表达载体的构建 张秦忠，陈 艳，李 卉，姜孝芳，李 艳，李惠武 (新疆医科大学基础 医学 院，乌鲁木齐 830011) 摘要：目的 构建pEGFP-N1一E6／E7融合基因真核表达载体。方法 应用聚合酶链反应技术 (polymerase chainreaction，PCR)从 SiHa细胞中扩增出人类乳头瘤病毒 16型(HPV16)E6／E7基因全长片段，并将其克隆到真 核表达载体 pEGFP—N1上。结果 获得了包含全长阅读框架的HPV16E6／E7基因，并成功克隆到真核表达载 体中。结论 成功构建了pEGFP—N1一E6／E7融合基因真核表达载体。 关键词 ：HPV16；E6／E7融合基 因；基因克隆 中图分类号：R737．33：R735．1 文献标识码 ：A 文章编号：1009-5551(2012)12-1623—04 Eukaryoticexpression vectorconstructionofhumanpapillomavirus type16E6／E7fusiongene ZHANGQin—zhong，CHENYan，LIHui，JIANGXiao-fang，LIYan，LIHui。WU (CollegeofBasicMedicine，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi83001I，China) Abstract：Objective ToconstructpEGFP—N1一E6／E7fusiongeneintoeukaryoticexpressionvector．Meth- ods PCRwasusedtoamplifythefragmentthatcontainedHPV16E6／E7ORFfrom SiHacells．Theam— plifiedfragmentwaslinkedwith eukaryoticexpressionvectorpEGFP—N1．Resuts DNA fragmentthat containedE6／E7ORFwasgained，andwegotaconstructofpEGFP—N1一E6E7．Conclusion Eukaryotic expressionvectorofE6／E7fusiongeneofHPV16wasconstructedsuccessfully． Keywords：HPV16；E6／E7fusiongene；geneclone 人类乳头瘤病毒 16型 (HPV16)是一类小型无 族宫颈癌和哈萨克族食管癌 的早期发生密切相 胞膜 的环状双链 DNA病毒 ，对鳞状上皮细胞极具 关 。]。HPV16早期编码 的两个致癌基 因 E6和 感染力Eli。维吾尔族宫颈癌与哈萨克族食管癌均属 E7与肿瘤 的发生和发展有着密切的关系，但具体的 于鳞状上皮细胞癌 ，是新疆地 区少数民族的特高发 发病机制 尚不清楚 。因此在单独构建 HPVI6E6、 疾病 。相关报道显示 HPV16的早期感染与维吾尔 E7真核表达载体的基础上 ，为了更好地探讨致癌基 基金项 目：国家 自然科学基金 (8l150029) 作者简介：张枭忠(1984一)，男，在读硕士，研究方向：脚瘤标志与肿瘤发生机制。 通信作者：李惠武，男，博士，教授 ，博士生导师，研究方向：食管癌分子发病机理，Email：huiwuli1234@163．corn。 1624 新 疆 医 科 大 学 学 报 第 35卷 因E6和 E7在肿瘤发生发展过程 中的交互协调作