牡丹花瓣脂氧合酶测定方法的研究.pdfVIP

山 东 农 业 科 学 2010，9：91～93 ShandongAgricuhuralSciences 牡丹花瓣脂氧合酶测定方法的研究 李铭韧，史国安 (河南科技大学农学院，河南 洛阳 471003) 摘 要：采用紫外分光光度法，以亚油酸钠为反应底物，研究了牡丹花瓣脂氧合酶 (LOX)的酶学特性并 建立了其测定体系。结果表明，牡丹花瓣脂氧合酶反应的最适 pH值为4．5，最适温度为45~C，最适底物浓度 为0．594mmolfL。该酶有着较好的热稳定性，90℃保温 1h后仍保持较高活性。 关键词：牡丹花瓣；脂氧合酶(LOX)；测定方法 中图分类号：Q556 文献标识号：A 文章编号：1001-4942(2010)09-0091—04 Determination M ethod ofLipoxygenaseActivityin PeonyPetal LIMing—ten，SHIGuo—an (CollegeofAgronomy，HenanUniversityofScienceandTechnology，Luoyang471003，China) Abstract Theenzymaticcharacteristicsoflipoxygenase(LOX)inpeonypetalwerestudiedbyuV— speetrophotometrywithhtesodium linoleateasthereactionsubstrate，htenhtedeterminationsystem wasbuilt． TheresultsshowedhtathteoptimumpH valueforhtereactionwas4．5：hteoptimum temperaturewas45℃ ；hte optimum substrateconcentrationwas0．594mmol／L．Theenzymehadagoodhtermalstabihty．Theenzyme activitykepthigherin90~C foronehour． Keywords Peonypetal；Lipoxygenase；Determinationmehtod 牡丹是原产我 国的世界名花，具有很高的观 HPOD)。在花瓣 中，HPOD再进一步被脂氢过氧 赏性和药用价值。牡丹花朵较大，开花期间香气 化物裂解酶(HydroperoxideLyas~，HPL)及其下游 浓郁，目前已分离到的与牡丹花瓣芳香气味有关 一 系列的酶催化，从而生成各种挥发性的小分子 的化合物主要是一些醇、醛、酯类物质 J。在植 醇、醛和酯类物质 。 物体内，这些小分子物质主要是由脂氧合酶／脂氢 目前，测定 LOX活性的方法很多。常规的 过氧化物裂解酶(LOX／HPL)联合催化途径催化 实验室测定方法有分光光度法、氧电极法、同位素 产生，其 中LOX是该途径的首个酶，也是一个关 标记法 等；快 速测 定方法 有 亚 甲蓝染 色法 键酶…。 (MBB)、胡萝 卜素染色法(CB)、淀粉 一碘化钾法 脂氧合酶(Lipoxygenase，LOX)，又叫亚油酸 (KI—s)等。其中，分光光度法具有快速、简便和 氧化还原酶、脂肪氧合酶、脂肪加氧酶或类胡萝 卜 易于连续测定的优点，有利于花瓣 LOX酶学性质 素氧化酶，广泛存在于哺乳动物、植物和微生物 的研究以及简便、准确、重复性好的LOX活性测 中。LOX是一种含非血红素铁或锰的加氧酶，能 定体系的建立，可为牡丹芳香气味形成的生理基 专一催化包括亚油酸、亚麻酸、花生 四烯酸在 内的 础研究提供依据 J。 具有顺 ，顺 一1，4一戊二烯结构 的多元不饱和脂