一株Ⅰ型鸭肝炎病毒的分离与鉴定.pdf

18 广西畜牧兽医 2009年Vo1．25(1) 一 株 工型鸭肝炎病毒的分离与鉴定 李 婵 ，李华 ，韦 平 ，黄智勇 (1．广西大学养禽与禽病研究所，广西南宁 530005；2．钦州市农牧发展有限公司，广西钦州 535000) 中图分类号：$858．325．2 文献标识码：B 文章编号：1002～52352【009)01—0018—02 鸭病毒性肝炎 (Duckviralhepatitis，DvH)是 琼脂平板和鲜血琼脂平板，置 37℃恒温箱中培养 雏鸭的一种急性传染病，以发病急、传播快、病程 24小时。 短、死亡率高为主要特征。临床表现为痉挛、抽搐 4．2 病毒分离 和角弓反张等神经症状，病理变化主要是肝脏肿胀 无菌采取病鸭的肝脏，用组织研磨器磨碎后， 和出血 【IJ。该病首先于 1945年 由Levine和Hofs— 用灭菌的生理盐水制成 1：5的组织匀浆悬液，反复 tad在美国发现并报道[22]，1953年开始蔓延到加拿 冻融三次，高速离心后，取上清液，加入双抗 (含青 大、德国、意大利、日本等国。随着我国各省养鸭业 霉素和链霉素)至终浓度 1000U／ml，过滤器过滤， 的发展，许多地区也经常报道有该病的发生，主要 接种 l0～14 日非免疫过鸭胚，每枚鸭胚注射 发生在3周龄以下的雏鸭，死亡率高达 90％～ 0．2ml，37℃孵育，弃掉24小时内死亡鸭胚，观察3 95％，给养鸭业造成巨大的经济损失。近年来，广 ～ 5天，收集96小时内死亡、且菌检为阴性的尿囊 西各地也发生该病，为了弄清病原及其特性，本文 液。第一代若在96小时内未死亡，则4℃冻死，收 对广西某鸭场发生的一例疑似雏鸭病毒性肝炎的 集尿囊液和胚体肝脏制成匀浆，按上述方法进行盲 病例进行了临床诊断和病原鉴定，现报道如下： 传，直到鸭胚死亡，收集尿囊液保存到一20℃的冰 柜，同时做细菌检查。 1 发病经过 4．3 病毒血凝效价的测定 2008年 1O月 20日，广西钦州市某水库肉鸭 按常规的微量血凝试验方法测定尿囊液的血 养殖场饲养 5000只 15日龄小鸭发生急性死亡。 凝效价。 当天上午 1l点以前死亡了196只，下午又死亡了 4．4 分离毒株鸡胚半数致死量(EU)5O)的测定 317只(当天已累计死亡率达 11％)。该群鸭未接 将分离毒株 F2代 的尿囊液按 1O一、10一、 种过病毒性肝炎疫苗。 10-510-610-7、10-810-9稀释，然后接种鸭胚， 每个稀释度接种3枚，接种量为O．2rn1傲 ，观察鸭 2 临床症状 胚死亡情况，6天后记录所有 的结果，按 Reed— 小鸭发病初期精神沉郁，然后双脚呈痉挛性运 Muench法计算ELD50[3J。 动，似游泳样，两翅下垂，行动迟缓，食欲废绝，两眼 4．5 分离株 中和试验 闭合，呈昏迷状态，数小时后死亡。有些病鸭则表 用灭菌生理盐水稀释病毒至含量为 200 现为全身痉挛和抽搐症状，拉黄色白色稀粪。临死 ELD50／0．2ml的浓度，然后分别与等体积 1：40、1： 之前呈 “角弓反张”姿势，最后腿伸直死亡。 80、1：160、1：320、1：640、1：1280稀释的鸭肝炎病 毒