分子检测技术在食源性致病菌检测中的应用.pdfVIP

畜牧与饲料科学 AnimalHusbandrynadFeedScience 2010，31(9)：83—84 分子检测技术在食源性致病菌检测中的应用 徐文君 ，周 玮 ，徐春祥 (1．江苏省产 品质量监督检验研究院，江苏 南京 210029；2．江苏省南通市产品质量监督检验所 ，江苏 南通 226000) 摘要 ：食品中的病原微生物是影响食品安全的主要因素之一 ，食源性致病茵的传统检测方法繁琐复杂、周期较长，因而， 快速、简便、特异性强的检测方法成为研究的热点。介绍并分析了几种基于PCR技术的分子生物学手段在食源性致病 菌检测中的应用。 关键词：食源性致病菌 ；PCR；检测 中图分类号 ：TS207．4 文献标识码 ：A 文章顺序编号 ：1672—519O(2O1O)O9一o083—02 ApplicationofM olecularTechnologyinDetectionofFood--bornePathogens XUWen—jan，ZHOUWei，XUChun—xiang (1．JiangsuProductQualitySupervisionandInspectionInstitute，Nanjing 210029，China；2．NantongProductQualitySupervisionand InspectionInstitute，Nantong 226000，China) Abstract：Food—bornepathogenisoneofthemostprimaryfactorsaffectingfood safety．Traditionalmethodstodetectfood—borne pathogensarecomplexandtime-consuming．Forthisreason，rapid，simpleandspecificdetectionmethodshavebecomearesearchhot spot．ThispaperintroducesandanalysesseveralmolecularbiologicalmethodsbasedO13．PCR andtheirapplicationsindetectingfood— bornepathogens． Keywords：food—bornepathogens；PCR；detection 随着生活水平的提高，人们越来越重视食品安全的问 基本相同．只是在同一反应体系中加入多对引物同时扩增 题。2003--2004年 的统计结果显示 ，我国食物中毒致病 因 多条 目的DNA片段 ，采用这一技术可同时检测多种病原微 素依次为微生物性、化学性、有毒动植物性病原。微生物性 生物。其 由于具有高效性、系统性、经济简便性等特点 ，而在 病原是导致食物 中毒的主要因素，中毒人数最多。因此 ，快 食品检测中得到广泛应用。Kawasaki等应用多重PCR技术 速而准确地检测与鉴定食品中的病原菌是及时有效控制和 同时检测 肉制品中沙门氏菌 、李斯特菌和大肠杆菌 0157： 预防病原细菌传播 、预防食物中毒的重要前提。传统的细菌 H7，其检测敏感度可以达到40CFU／kg。许一平等根据沙门 学培养方法需经富集培养、选择性分离、形态特征观察、生 菌 invA序列 ，设计 3对特异性引物进行 多重 PCR，可同时 理生化反应 、血清学鉴定等过程 ，操作繁琐复杂 、耗时费力 ， 检测-DNA的敏感性分别为 10．2。10．2和 102．0Pg．检测时间 而且无法对人工难以培养的病原菌进行检测 。近年来 ．随着 仅需4h。Hwang等建立 了检测 19种金黄色葡萄球菌毒素 分子生物学技术的迅速发展 ，出现了很多适合于食源性细 基因的多重PCR方法，灵敏度为 0．2pg，并用该方法检测了 菌检测和分析的分子生物学方法。这些方法具有操作简便 、 143个从韩 国鸡 肉和猪肉中分离的金黄色葡萄球菌品种 ，发 快速 、灵敏度高和特异性强等特点 ，通常只