壳聚糖／聚丙烯酸纳米粒子对蛋白质的吸附行为.pdfVIP

离子交换与吸附，2011，27(5)：400—409 10N EXCHANGEANDADSORPTION 文章编号：1001．5493(2011)05—0400—10 壳聚糖／聚丙烯酸纳米粒子对蛋白质的吸附行为 赵海利 李从欣 郭天瑛料 功能高分子材料教育部重点实验室 南开大学高分子化学研究所，天津 300071 摘要：以马来酸酐改性的壳聚糖 (MAHchitosan)和丙烯酸 (AA)为单体，采用反相微乳液聚 合法制备了AA含量分别为77％ (AACs)和 29％(Cs．AA)壳聚糖／聚丙烯酸复合纳米粒子。 TEM结果表明，该复合纳米粒子平均粒径为 125150nm，进而研究了其对牛血红蛋 白 (Hb)、 牛血清白蛋白 (BSA)和溶菌酶 (Ly)吸附和脱附行为。AA．Cs对各种蛋白的吸附量均较高； 而cs．AA对3种蛋白的吸附则具有一定选择性。AA．cs对等电点低于脱 附pH值的Hb的脱附 量较大。cs—AA粒子在较低 pH值 (pH=3．4)时对吸附有利，但在高pH值 (pH=6．6)进行吸 附时，对脱附更为有利。 关键词：反相微乳液聚合；壳聚糖纳米粒子；吸附与脱附；蛋白质 中图分类号：0647．3 文献标识码：A 1前 言 壳聚糖 由于其生物相容性、生物可降解性、无毒性和易于衍生化等优 良特性，作为生 物医用材料得到广泛应用，尤其在抗癌类药物和蛋白质药物载体方面 1【】。在微球给药体系 的研究中，人们发现纳米粒子在释药性能上会具有独特的优越性。纳米粒子能够穿过上皮 组织，通过毛细血管直接进入器官和细胞内部，从而可 以更有效地被吸收。Panyam 等 的研究表明当粒径为 100nm 时，被小鼠肠内细胞吸收的吸收率是粒径为 1—101xm 微球的 15250倍。而对于壳聚糖基的蛋白载体材料，蛋白药物的上载方式是一重要问题。通常包 埋是最常用方式，其优点是方法简便、易制备，但要求粒子的形成条件必须与蛋白上载条 件一致。这对不相同的蛋白药物而言过于苛刻。另外，就是壳聚糖粒子还需多通过一步离 子沉淀法制备，造成结构上不稳定性，尤其在偏酸性条件下，有时还需要后交联，而后交 联过程不可避免会影响已上载蛋 白的稳定性和活性。根据蛋 白的表面吸附作用的上载模 式，可以预先制备稳定形态结构和尺寸的粒子，以克服上述包埋上载的缺陷，而该上载模 式主要依靠材料与蛋 白的相互作用，因此，系统考查材料对蛋 白的吸附行为将为该类材料 收稿日期 ：2010年 I2月22日 项 目基金：国家 自然科学基金 ；纤维材料改性国家重点实验室基金 (东华大学)(LK0808) 作者简介：赵海~J(1981～)，女，河北省人，硕士研究生 通讯联系人 E-mail：tyguo@nankai．edu．cn 第27卷第5期 离 子 交 换 与 吸 附 ·401· 的设计提供依据 ’-刚。 本工作采用反相微乳液聚合的方法制备了马来酸酐改性壳聚糖＼聚丙烯酸交联纳米粒 子，该交联纳米粒子在pH值为2一l0的条件下均能稳定存在。进而考察了引入羧基的材料 在不同pH下对蛋 白质的吸附和脱附行为。 2实验部分 2．1 试剂 壳聚糖 (cs，分子量 50kDa，脱乙酰度为80％，玉环海洋生物化学有限公司)；马来酸 酐 (MAH，分析纯)；N，N．二 甲基双丙烯酰胺 (BAM，分析纯)；聚乙二醇二丙烯酸酯 (PEG．DA，分析纯)；柠檬酸 (分析纯)；磷酸氢二钠 (Na2HPO4·12H2O，分析纯)；牛血红 白蛋白 (fro，分子量64．5kDa)；牛血清 白蛋白 (BSA，分子量 68kDa)；溶菌酶 (Ly，分子 量 14．3kDa)。环己烷 (分析纯)；石蜡 (化学纯)；氯苯 (分析纯)；甲苯 (分析纯)；二甲苯 (分 析纯)；异戊醇 (IPA，分析纯)；OP一10(化学纯)；Span60(化学纯)；Span80(化学纯)；Tween80 (化学纯)；丙烯酸 (AA，分析纯，使用前减压蒸馏)。 2．2 马来酸酐改性壳聚糖的制备 马来酸酐改性壳聚糖按照文献