多重PCR技术用于检测牙龈卟啉单胞菌致病岛rag基因的研究.pdfVIP

546 ChineseJournalofPracticalStomalology Sep．2011Vo1．4 (1．9 论 著 多重PCR技术用于检测牙龈卟啉单胞菌 致病岛rag基因的研究 张玉杰 ，郭 杨 ，张 瑾 ，毛春梅 ，肖水清 文章编号：1674—1595(2011】09—0546—04 中图分类号：R78 文献标志码：A 摘要：目的 探讨 多重PCR技术用于检测牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis，P．gingivalis)致病岛rag基因 的可行性，并研究致病岛rag基因在毒力株和非毒力株 中的分布情况。方法 本研究于2011年1—6月在山东省 口腔生物医学重点实验室进行 ，对P．gingivalis毒力株和非毒力株进行厌氧培养，采用普通PCR和多重PCR分别对 他们的致病岛rag基因进行检测，对比检测结果，并对临床标本进行预实验研究。结果 普通PCR和多重PCR均 能对P．gingivalis致病岛rag基因进行检测，并且结果一致。多重PCR可用于临床标本的检测。致病 岛rag基因不 同基因型在毒力株和非毒力株中的分布不同，rag—l型存在于高毒力株P．gingivalisW83中，而rag一4型存在于低毒 力株P．gingivalisATCC33277中。结论 致病岛rag基因与细菌致病性密切相关；多重PCR技术省时省力、简单快 速 ，为后续临床标本 中rag基 因的快速检测提供实验依据。 关键词：多重PCR；牙龈卟啉单胞菌；致病岛rag基 因 DetectionofraggenotypesofPorphyromonasgingivaliswithmultiplePCR． ZHANG -jie，GUO ， ZHANGJin，MAOChun—mei，XIAOShui—qing．CollegeofDentistry，BinzhouMedicalCollege，Binzhou256603，China Abstract：Objective TooptimizemuhiplePCRreactionconditionsandtodetectraggenotypesofPorphyromonasgingi— valisinthevirulencestrainandavirulentstrains．Methods ThisstudywascarriedoutfromJanuary2011toJune2011 inShandongProvincialKeyLaboratoryofOralBiomedicine．Anaerobicculturewasdoneinthevirulencestrainandavir— ulentstrainsofPorphyromonasgingivalis，anddetecttheraggenotypesofPorpByromonasgingivaliswithmultiplePCR andconnllonPCR．AndoptimizemuhiplePCRreactionsystem forpre—experimentalstudyofclinicalspecimens．Results BothcommonPCR andmuhiplePCRcouldbeusedtodetectpathogenicislandsgeneofPorphyromonasgingivalis， andresultswereconsistent．OptimizedmuhiplePCRcouldbeusedforthedetectionofclinicalspecimens．Thedistribu— tionofpathogenicislandraggeneofdifferentgenetictypeinthevirulencestrainandavirulentstrainswasdifferent． Rag一1existedinhighlytoxicstrainW83andrag一4 inminimallytoxicstrainATCC33277．Conclusion Pathogenicis— landsgeneofPorphyromonasgingivalisiscloselyrelatedtothebacterialvirulence．Mult