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第二章 饲用益生菌的研究 88 第一节 饲用益生菌的筛选 88 2.1.1益生菌的作用 88 2.1.2益生菌筛选方法 88 2.1.3益生菌筛选结果 88 第二节 饲用益生菌的益生菌的鉴定 102 2.2.1零排放II号益生菌的形态学 102 2.2.2零排放II号益生菌的生理生化特性 103 2.2.3零排放II号益生菌的脂肪酸鉴定 105 2.2.4零排放II号益生菌的分子鉴定 106 第三节 饲用益生菌的生物学特性 102 2.3.1零排放II号益生菌的生长曲线 102 2.3.2零排放II号益生菌的碳氮营养需求 103 2.3.3零排放II号益生菌的矿物营养需求 105 2.2.4零排放II号益生菌的最适生长温度 106 第四节 饲用益生菌的拮抗特性 109 2.4.1零排放II号益生菌对靶标大肠杆菌的对峙作用 109 2.4.2零排放II号益生菌对靶标大肠杆菌的抑制效应 110 2.4.3零排放II号益生菌胞外抑菌物的测定 111 2.4.4作用浓度对零排放II号益生菌拮抗能力的影响 112 2.4.5培养时间对零排放II号益生菌拮抗能力的影响 114 2.4.6培养基pH值对零排放II号益生菌拮抗能力的影响 116 2.4.7发酵转速对零排放II号益生菌拮抗能力的影响 117 2.4.8零排放II号益生菌对靶标大肠杆菌拮抗能力的讨论 119 第五节 饲用益生菌的作用机理 120 2.5.1关于细菌病原动力学 120 2.5.2零排放II号益生菌在小白鼠体内定殖特性 123 2.5.3零排放II号益生菌对小白鼠毒力的时间动力学模型 126 2.5.4零排放II号益生菌对小白鼠毒力的浓度动力学模型 127 2.5.5零排放II号益生菌对小白鼠促长作用的动力学模型 129 2.5.6零排放II号益生菌对感染K88的小白鼠控病模型 132 2.5.7零排放II号益生菌对鸡免疫功能的影响 138 第六节 零排放II号益生菌的动物饲养应用 141 2.6.1零排放II号益生菌在鸡饲养中的应用 141 2.6.2零排放II号益生菌对鸡的防病效果 142 2.6.3零排放II号益生菌对鸡的增重效果 143 2.6.4零排放II号益生菌对鸡肉料比的影响 144 第二章 饲用益生菌的研究 第一节 饲用益生菌的筛选 2.1.1益生菌的作用 随着科学的发展和认识的深入，人们对抗生素和化学药物带来的副作用有了更深刻的认识。首先，抗生素的使用会破坏正常微生物的生态平衡，引起菌群失调。其次，抗生素的长期使用会促进细菌耐药性增加，然后通过R因子发生耐药性传递，使耐药菌株增加，并有可能转移到人体，威胁人类健康。同时大量使用抗生素造成畜禽产品中的药物残留也会严重影响人类健康。因此欧美许多国家已对抗生素的使用作出了许多限制。为保证畜禽的生产性能与健康状况，抗生素替代品的研究已成为各国动物营养学界研究的热点，其中在微生态理论的基础上发展而来活菌制剂、微生物培养物、微生态制剂是最理想的无毒副作用的抗生素替代品。 益生素，又称益生菌、促生素、利生剂、活菌制剂或微生态制剂等，是指摄入动物体内、参与肠内微生物平衡的活性微生物培养物。益生素能够通过直接增强动物对肠内有害微生物群落的抑制作用。或者通过增强非特异性免疫功能来预防疾病，并间接起到促进动物生长和提高饲料转化率的作用。众多试验证实了益生素具有提高增重、改善饲料转化效率、促进畜禽机体免疫功能、降低死亡率及改善环境等效果。目前使用的益生素主要是芽孢杆菌、乳酸杆菌、粪链球菌等单一菌种或复合菌种的制剂。 2.1.2益生菌筛选方法 从畜禽肠道、土壤、特殊生境集样品分离出的微生物（主要为芽孢杆菌）中，以肠道病原菌为靶标筛选有益微生物，作为益生素菌种的资源，以便进一步复筛测定。靶标菌株：Ⅰ：猪大肠杆菌，编号K88；Ⅱ：鸡大肠杆菌（畜牧所提供）；Ⅲ：沙氏门菌。供试菌株：选自研究所菌资源库中的10株细菌零排放II号益生地衣芽孢杆菌靶标菌株活化：-70℃保存的靶标菌株（猪大肠杆菌K88、鸡大肠杆菌、沙氏门菌）于NA平板上活化，37℃培养24h。然后挑取一环接种于装瓶量为1/5 液体培养基中，37℃、170rpm恒温摇床振荡培养，24h后取样，用血球计数板计算培养液的菌体浓度，并将菌液浓度调整为×106 cfu/ml浓度的孢子悬浮液。供试菌株活化：-70℃保存的10个芽孢杆菌菌株于NA平板上活化，30℃培养24h。然后挑取一环接种于装瓶量为1/5液体培养基中，30℃、170rpm恒温摇床振荡培养，48h后取样，用血球计数板计算培养液的菌体浓度，并将菌液浓度调整为×106 cfu/ml浓度的孢子悬浮液。采用对峙试验进行生防菌的初筛：按图2的涂板方式，将益生菌划竖线，从益生菌边缘但不接触，