采用FLx800荧光分光光度计检测钙离子浓度变化.pdfVIP

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2017-09-13 发布于重庆
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采用FLx800荧光分光光度计检测钙离子浓度变化.pdf

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Gene News 基因快讯年第期 2007 2 Bio-tek系列应用介绍之二采用FLx800荧光分光光度计检测钙离子浓度的变化二价阳离子--钙，介导了大量的细胞内的生物学钙离子检测反应，一些特殊的荧光复合物可以和钙离子相结合，这样就可以在不同的情况下对钙离子的浓度变化进行检钙离子探针是细胞内最常用的指示剂。Roger 测。本文报道了采用FLx800荧光分光光度计检测钙离 Tsien和它的同事们对这些指示剂做了进一步的提高。子浓度的快速变化过程。正如我们前面所提到的，我们经常用一种荧光染料去检测钙离子，并确定其在细胞内的组成和定位。最常使用介绍的钙离子特异性结合位点是1,2-bis(2-aminophenoxy) 细胞生物学经常检测和定量细胞内一些静息离子的 ethane-N,N,N,N-tetraacetic acid(BAPTA)(图－＋ 2＋光谱改变，比如Cl ，Na 或者Ca ,检测这些离子必 1)。很多阴离子羧基集团可以与二价钙离子相结合，须采用探针或染料的方法。典型的染料都包括一个荧表1.常用钙离子指示剂的推荐滤光片光集团和特异性的结合位点可以和上述的静息离子相结合。 Compound Excitation Filter(s) Emission Filter(s) Dual wavelength Ratiometric indicators 钙离子 Fura-2 340/11 380/20 508/20 细胞内钙离子的水平可以影响细胞内的很多反应过 Excitation: (5002043) (7082228) (7082218) 程。当细胞外钙离子的浓度急剧升高达到3-4mM,而细 338/366 nm or Emission: 340/30 胞内的钙离子还保持在一个较低的水平100nM。根据需 505 nm (7082230) 要，钙离子可以通过流动由细胞外进入到细胞内，或者 Indo-1 340/30 410/10 485/40 由细胞内部的储存池释放出来。当肌肉收缩时引起细胞 Excitation: (7082230) (7082242) (7082209) 355 nm or 内部储存的钙离子释放，而细胞外的神经元末梢释放神 Emission: 485/20 经递质则引起细胞外的钙离子进入细胞内部。