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多肽修饰的梳状聚乙二醇改性表面及其内皮细胞相容性.pdf

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多肽修饰的梳状聚乙二醇改性表面及其内皮细胞相容性 * 计剑 浦鸣 李晓林 沈家骢 (浙江大学高分子科学与工程系杭州 310027) 聚乙二醇(PEG)由于其特殊的物理化学性能、良好的生物惰性和非免疫性、 非抗原性,在生物医学领域有着广泛的应用背景和重要的研究意义。高密度支化 型PEG 具有体积排斥效应大的特点,较线形PEG 更好的抗特异吸附性。本课题组 通过原子转移自由基聚合(ATRP)的方法合成了高密度梳状 PEG (CPEG),并将 CPEG 端羟基转化为反应活性较高的醛基,通过表面接枝方法对氨基化的聚酯膜 进行表面改性,并利用细胞生长因子 (RGD)和氨基酸修饰CPEG,红外光谱、接 触角和XPS 的结果显示,该方法可有效固定氨基酸和多肽。内皮细胞培养实验结 果表明,用CPEG 改性的表面24 小时内的细胞黏附量比LPEG 改性的表面少,利用 CPEG 末端的高密度活性反应基团固定细胞生长因子RGD 后,其24 小时内抗黏附 仍起主导地位,但48 小时后的细胞增殖率和72 小时后的细胞蛋白质含量均高于 LPEG 改性的表面。这种设计能有效模拟细胞糖质衣结构的特异性功能,实现在 非特异性阻抗基础上的特异性诱导过程。 1.实验部分 1.1 原料 PET 薄膜PEI(Mw=25000 ,Aldrich) ,醋酐,二甲基亚砜(DMSO) ,CPEG (Mw=12000 ),参照文献[1]制备。 1.2 本文中 PEG 端羟基的醛基化和表面接枝按照文献[2]制备,如图 1。 CHO NH2 CHO CHO CHO CHO RGD CHO NH 2 CHO CHO CHO PEI NH CHO CHO CHO CHO RGD 2 CHO CHO NH2 CHO NH2 CHO NH CHO 2 PET Fig1 Scheme of surface modification on PET substrate 1.3 细胞培养 采用人脐静脉内皮细胞系进行内皮细胞的培养,细胞种植密度约为 4 × 4cell/ml 。参照文献[3,4]对细胞的粘附率、增殖率以及蛋白质含量进行测试。 10 1 2 .结果与讨论 本文采用内皮细胞系考察了RGD 修饰的不同类型PEG 改性表面的细胞相容 性,图2 中TLPEG1 和TLPEG2 分别表示分子量为4000 和10000 的LPEG 接枝 120 Cell attachment 的PET 表面,TCPEG 表示CPEG 接枝 Cell proliferation 100 Cell protein content 改性的PET 表面,结果表明,在24 小 80 时内经

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