蛋白质和多肽PEG定点修饰研究进展.pdfVIP

蛋白质和多肽的 PEG 定点修饰研究进展 1 1 2 王凤山 ，赵婷 ，袁勤生 （1. 山东大学药学院，山东大学国家糖工程技术研究中心，山东 济南 250012 ； 2. 华东理工大学生物工程学院，上海 200237 ） 摘要：目的 综述蛋白质和多肽的PEG定点修饰研究进展。方法 参阅近年来的文献，就氨基、 巯基、非天然氨基酸及酶和过渡金属催化修饰几个方面对蛋白质和多肽的PEG定点修饰研究 进行归纳总结。结果与结论 PEG定点修饰有利于保持蛋白质或多肽的生物活性，随着材料 科学、新的化学专一反应技术、蛋白质化学合成和重组技术的发展进步，以及准确快速灵敏 的分析方法的建立，PEG定点修饰技术将具有更加广泛的适用性和广阔的发展前景。 关键词：PEG 修饰；定点修饰；蛋白质和多肽 Research Progress in Site-Specific PEGylation of Protein and Peptide 1 1 2 WANG Feng-shan , ZHAO Ting ，YUAN Qin-sheng (1. School of Pharmaceutical Science, National Glycoengineering Research Center, Shandong University, Jinan 250012；2. School of Bioengineering, East China University Of Science And Technology, Shanghai 200237 ) 蛋白质或多肽的聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG) 修饰即PEG化(pegylation)，是将活 化的PEG通过化学方法以共价键偶联到蛋白质或多肽分子上。自1977年Davis首次采用PEG 修饰牛血清白蛋白以来，PEG修饰技术迅速发展，并广泛应用于多种蛋白质和多肽的化学修 饰，PEG修饰技术也从理论走向实际的药物应用。 PEG修饰能赋予蛋白质和多肽类多种优良性能[1,2] ，具体表现为循环半衰期延长、免疫 原性降低或消失、毒副作用减少以及物理、化学和生物稳定性增强等，在很大程度上扩宽了 蛋白质和多肽的的应用范围。其机理[3]可能为（见图1[4] ）：蛋白质PEG修饰后，相对分子质 量（Mr ）增大，当修饰后的蛋白质的Mr达到或超出肾小球滤过阈值时，蛋白质随血液循环 进入肾脏后就可以逃避肾小球的滤过作用；由于PEG 的屏蔽效应，使得修饰后的蛋白质或多 肽不易受到各种蛋白酶的攻击，降解速率明显降低，稳定性提高，因而可以在血液循环中停 留更长的时间；PEG在溶液中呈无规则卷曲，作为一种屏障，能掩盖蛋白质表面的抗原决定 簇，使得蛋白质不能与各种细胞表面受体结合，不被机体的免疫系统识别，避免了相应抗体 的产生，降低了蛋白质的免疫原性；PEG与蛋白质偶联后能将其优良的理化性质赋予蛋白质， 如能改善蛋白质的生物分布和溶解性能。 目前，已有多种PEG修饰的蛋白质和多肽用于生物医药领域，通过FDA批准进入市场， 如PEG 修饰的腺苷脱氨酶(PEG-ADA) 、天冬酰胺酶(PEG-L-asparaginase) 、干扰素α-2b 2321 (peginterferon alfa-2b) 、干扰素α-2a(peginterferon alfa-2a) 、重组人粒细胞集落刺激因子 (pegfilgrastim)等。 图 1 蛋白质 PEG 修饰后的优良性能 Fig 1 Main advantages of PEGylated protein 传统的 PEG 修饰多为随机修饰，存在修饰剂呈现多种聚合度、选择性不够高、修饰后 的蛋白质分子Mr 分布宽、活性降低、稳定性有时不够理想等突出问题。相反, 定点修饰能 够选择特定基团进行修饰, 避免或减少对活性位