几丁质酶结构域内含蛋白1 (Chid1) 基因剔除小鼠的建立.pdfVIP

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2013, 35(3): 316–32 1 http ://www.cj 几丁质酶结构域内含蛋白1(Chid1) 基因剔除小鼠的建立 奚 骏 吴友兵 孙 霞 任建科* (上海南方模式生物研究中心, 上海201203) 摘要 建立几丁质酶结构域内含蛋白1(chitinase domain containing 1, Chid1)基因剔除小鼠, 观察小鼠表型和发育差异。设计了合适的基因剔除策略, 成功构建了基因剔除打靶载体。以电穿 孔方法将打靶载体导入ES细胞(embryonic stem cell), 用G4 18和Ganciclovoir进行正负筛选, 挑选抗 药的阳性克隆, 提取ES细胞基因组DNA, 用长臂PCR鉴定出阳性ES细胞。将阳性ES细胞复苏培养 后注入小鼠囊胚, 获得嵌合体小鼠。嵌合体小鼠与C57BL/6J