二氯荧光素双醋酸盐年应用与争论.pdfVIP

医药导报２００７年４月第２６卷第４期 ·３４３· 二氯荧光素双醋酸盐４０年的应用与争论 陈修平，杜冠华 （中国医学科学院、中国协和医科大学药物研究所国家药物筛选中心，北京　１０００５０） ［摘　要］　查阅近４０ａ来广泛应用的荧光探针二氯荧光素双醋酸盐（２’，７’ｄｉｃｈｌｏｒｏｄｉｈｙｄｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｉｎｄｉａｃｅｔａｔｅ， ＤＣＦＨＤＡ）相关的文献，并结合作者工作实践对ＤＣＦＨＤＡ的应用与争论进行综述。ＤＣＦＨＤＡ被广泛应用于细胞内 ２ ２ ２ ＲＯＳ（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ）的研究，也可以用于一氧化氮（ＮＯ）、过氧化氢（ＨＯ）的测定，但其机制、特异性等尚有待 ２ ２ 于商榷。 ［关键词］　 二氯荧光素双醋酸盐；荧光；过氧化氢；一氧化氮 ［中图分类号］　Ｒ９２７　　　［文献标识码］　Ａ　　　［文章编号］　１００４０７８１（２００７）０４０３４３０７ 　　荧光是基态分子受到紫外可见光的照射激发生 定ＮＯ的报道，但以测定 ＲＯＳ的文献最多。其实， 成激发态分子后失去部分激发能，返回基态时发射的 ＤＣＦＨＤＡ是近年来用于测定 ＲＯＳ的最多的试剂，自 ２ 光量子。荧光是自然界很常见的现象，利用物质发射 １９９５年以来采用ＤＣＦＨＤＡ测定 ＲＯＳ的文章就有数 ２ 荧光的特性进行定量、定性分析的光学方法称为荧光 百篇。 法（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｍｅｔｈｏｄ）。荧光法以其灵敏度高、选择 ２　ＤＣＦＨＤＡ的理化性质　 ２ 性好、干净无放射性污染等优点，在医学、药学领域得 ２．１　ＤＣＦＨＤＡ的结构　ＤＣＦＨＤＡ的分子式为 ２ ２ 到了广泛的应用，一些新的荧光物质不断合成，新的荧 ＣＨ ＣｌＯ，相对分子量为４８７．３，化学结构式见图１。 ２４ １６ ２ ７ 光分析方法也不断建立。笔者综述近４０ａ来荧光探 针 二 氯 荧 光 素 双 醋 酸 盐 （２’，７’ｄｉｃｈｌ ｏｒｏｄｉｈｙｄｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｉｎｄｉａｃｅｔａｔｅ，ＤＣＦＨＤＡ）的应用简 ２ 史、理化性质、在药理学中的应用及其指示作用的评 价。 １　ＤＣＦＨＤＡ的应用史　 ２ ＤＣＦＨＤＡ是一种无荧光的物质，可转换成 ＤＣＦ ２ （２’，７’ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｉｎ）即二氯荧光素，后者具有强 图１　ＤＣＦＨＤＡ的化学结构式　 ２ 烈的荧光。早在 １９３８年，ＳＣＨＡＬＥＳ等就用氢化荧光 ２．２　ＤＣＦＨＤＡ的合成　ＤＣＦＨＤＡ是由ＤＣＦ衍生 ２ ２ ［１］ 素（ｆｌｕｏｒｅｓｃｉｎ）溶液来测定过氧化氢（ＨＯ） 。由于 而来的。ＤＣＦ先与乙醇、冰醋酸等反应生成 ＬＤＣＦ ２ ２ 氢