葡聚糖酶基因双拷贝工程菌株构建与发酵研究.pdfVIP

葡聚糖酶基因双拷贝工程菌株 的构建与发酵研究 裴红蕾陈轶群 吕俊楠杨雯涵李志民曹云鹤 中国农业大学动物科技学院动物营养学国家重点实验室北京 摘 要本试验旨在研究 葡聚糖酶双拷贝基因毕赤酵母工程菌株的构建及发酵 首先通过对质粒 进行 扩增获得密码子优化的 葡聚糖酶基因 用 和 双酶切后与毕 赤酵母表达载体连接 获得重组质粒 该重组质粒经 线性化后转化毕赤酵母 菌 株利用不含组氨酸的 平板和摇瓶培养筛选重组菌株命名为 制备 感受态细胞再用线性化的重组质粒 二次转化在含有抗生素 的 平板上筛选 基 因双拷贝重组菌株 双拷贝重组菌在 发酵罐中进行高密度发酵培养及甲醇诱导表达