五种染色方法对小鼠圆形精子染色效果的比较.pdfVIP

生 物 医 工 程 研 究 2o1o JoumalofBiomedicalEngineeringResearch… ，’29(2)：…‘113～…l16 五种染色方法对小鼠圆形精子染色效果的比较* 刘建伟，孟小倩，陈玉洁，潘杰，艾洪滨，刘树真△ (山东师范大学生命科学学院，山东省动物抗性生物学重点实验室，济南 250014) 摘要 ：比较五种染色方法对小鼠圆形精子 (roundspermatid，ROS)染色的效果 ，寻找一种鉴定 圆形精子简 单、有效的染色方法。以性成熟的昆明白鼠为实验材料，制备睾丸细胞悬液，分别用瑞氏、瑞 氏一姬姆萨、姬 姆萨、改良品红、苏木精五种方法对小鼠生精细胞进行染色，比较不同染色方法下圆形精子的形态。相 比于 其它四种染色方法，瑞氏一姬姆萨染色后能清晰地观察到圆形精子细胞膜和核膜的边缘，核质分明，与其它 时期生精细胞区别明显。瑞 一姬染色法是一种简单、有效的鉴定圆形精子形态的染色方法。 关键词：小鼠；圆形精子；鉴定；染色方法 中图分类号：R318 文献标识码 ：A 文章编号：1672．6278(2010)02．0113．04 ComparisionofFiveStainingM ethodsonM ouseRoundSpermatid LIUJianwei，MENGXiaoqian，CHENYujie，PANJie，AIHongbing，LILTShuzhen (CollegeofrfieScience，Shan~ngNormalUniversity， laboratoryofAnimalResistanceofShond~ngProvn／ce，Jn／an250014，Ch／na) Abstract：Tocomparefivestainingmethodsonmollseroundspermatid(ROS)morphologyevaluationandtofindarelativelysimpleand effectivemehtodofidentifying ROS．Testicttlarcellsuspensionwasobtainedfrom sexualmaturationmOllSe．TocomparehtemoprhologyofROS， germ cellsw啪 stained separatelybyWright’Sstaining ，Wright—Giemsa staining，Giemsastaining ，Magenta stainingnadHematoxylin staining ．Comparedtotheohterstaining mehtods，Wright—Giemsastaining mehtodWas thebestolle．Wright—Giemsastainingisaconvenient nadeffectivemehtodwhichCna be usedtoidentifyROSmoprholoyg ． Keywords：Mouse；RoundSpermatid；Identify；StainingMehtod 者在精液、附睾和睾丸中都没有精子，还有一些不育 1 引 言 男性即便是在睾丸中存在精子，也常常是死精子或 哺乳动物的精子发生是一个非常复杂的过程， 者严重畸形的精子。对于此类患者可用圆形精子代 大体上可分为三个阶段：(1)精原细胞的有丝分裂 替成熟精子做胞质内显微注射以使患者得到 自己的 期，包括精原干细胞的增殖、更新和精原细胞的分 后代 。1993年，Ogura_2 分别将仓 鼠和小 鼠的圆形 化；(2)精母细胞的减数分裂期，经过两次减数分裂 精子注入卵周隙，然后加一直流脉冲，使圆形精子融 后初级精母细胞分化为单倍体的圆形精子；(3)精子 入卵母细胞，分别获得 20％一40％和 30％的融合 形成期，圆形精子经过一系列形态变化形成精子l1]。 率，并首次证实圆形精子具有与精子同样的发育潜 圆形精子为第二次减数分裂完成后的产物，其细胞