AFM的使用与实际应用探究.pdfVIP

AFM 的使用与实际应用探究 杜恺 06300190003 【摘要】原子力显微镜AFM ，作为扫描隧道显微镜家族中的一员，因其具有高分辨率，观 测条件广，样品制作简便，可直接输出成像等诸多优点，在生物细胞和分子学水平上的研究 已获得了广泛的应用，并且具有巨大的发展空间。本文简要介绍了一款原子力显微镜 easyScan E-AFM 的基本原理与使用操作，扫描给出了几种标准样品的结果。简述了AFM 在 生物研究中的应用，并初步尝试探究了其对血红蛋白结构的扫描，并最后对此给出了一些改 进建议与设想。 【关键词】原子力显微镜 AFM 原理与操作 AFM 的生物研究应用 血红蛋白结构 easyScan E-AFM 基本原理 本实验中选用的easyScan E-AFM 原子力显微镜采用的是激光反射式，恒力非接触模式 扫描。当微悬臂和探针接近样品时，所产生的很弱的范德华力使得悬臂弯曲，偏转激光，在 感应器上接收到被偏转的信号，从而利用扭矩测微这一原理实现了对样品的高精度成像。其 原理示意图如图一所示。 easyScan E-AFM 的扫描 范围和分辨率： X-Y 最大 扫描范围： 60-80um Z 方向最大 范围：20um XY 平面分 辨率：1.7nm 图一：原子力显微镜原理示意图 easyScan E-AFM 使用操作与标准样品扫描 1. 探针感应片的安装(横线上部伸出安装台，探针位于正中可使信号接通，安装到位) 图二：easyScan E-AFM 使用的探针 2. 进针 （先手动进针，时刻观察避免撞针，再自动完成进针） 3. 调节波形水平 （无法完全调平时，注意清洁吹干样品，并注意控制室内湿度） 4. 标准样品扫描结果 一维标准样品 二维标准方格样品 二维标准圆形样品 AFM 的特性与生物研究中的应用 AFM 由于分辨率高、样品制备要求低、适用范围广等众多优点，已经开始在生命科学 研究中发挥着重要的作用和广泛的应用。这主要得益于原子力显微镜的样本可以是生理状态 的各种物质, 在大气条件或溶液中都能进行, 因而只需很少或不需对样品作前期处理, 这 样, 就使A FM 能观察任何活的生命样品及动态过程 （1）。 最早AFM 对肺表面活性脂蛋白、钙调蛋白、精子膜蛋白、脱铁铁蛋白等多种膜蛋白进 行了研究，并且在分子水平对结晶过程进行定量分析。随AFM 探针技术的发展，最近对蛋 白质这种生物大分子的研究已达到可以同时对多种参数进行计量和测算的程度。AFM 还成 功地观察了肌动蛋白、血纤维蛋白原、免疫球蛋白等游离蛋白质分子 （2）。 此外，更为精良的A FM 还具有对标本的分子或原子进行加工的力行为, 例如: 可搬移 原子, 切割染色体, 在细胞膜上打孔等等 （1）。 AFM 扫描血红蛋白结构的初步探究 针对以上特性，考虑到血红蛋白在人体血氧输运中