施肥对设施菜地氨氧化细菌群落和丰度的影响.pdfVIP

农业环境科学学报 2012，31(12)：2425-2432 JournalofAgro—EnvironmentScience 施肥对设施菜地氨氧化细菌群落和丰度的影响 王亚男 ，曾希柏 ，俄胜哲 ，白玲玉 ，李莲芳 ，苏世呜 ，沈灵凤 (1．中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 农业部农业环境重点实验室，北京 100081；2．甘肃省农业科学院土壤肥料与节 水农业研究所 ，兰州 730070) 摘 要：以甘肃武威设施菜地为对象 ，采用amoA基因末端限制性片段多态性分析 (PCR-TRFLP)技术与实时荧光定量PCR(Real— timePCR)相结合的方法，研究了不同施肥处理下土壤中氨氧化细菌群落组成和丰度的变化。结果表明：设施菜地中氨氧化细菌的 优势种群均为Nitrosospiracluster3属，亦含有少量Nitrosomanascluster7属。定量PCR分析发现在当地农民习惯施肥用量一半的 处理下(112MNPK)，O～20cm和2O～40cm土层中氨氧化细菌的丰度最大值分别为每克干土9．95x107,6．65x10拷贝数，比不施肥处 理增加了105．0％和315．3％。施肥类型、土壤层次均是导致氨氧化细菌群落结构和丰度变化的重要因素。研究结果对进一步探讨设 施栽培条件下氨氧化细菌的功能、环境适应机理及其在土壤氮素循环中的作用等，均具有较大的参考意义。 关键词：氨氧化细菌；施肥；群落结构 ；T—RFLP；实时荧光定量PCR 中图分类号：S154．36 文献标志码：A 文章编号：1672—2043(20l2)12—2425—08 EffectsofFertilizationTreatmentsonCommunityStructureandAbundanceofAmmonia-oxidizingBacteria inGreenhouseSoil WANGYa—nan，ZENGXi—bai，ESheng—zhe，BAILing-yu，LILian-fang，SUShi-ming，SHENLing—feng ‘ (1．InstituteofEnvironmentandSustainableDevelopmentinAgriculture，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，KeyLaboratoryofAgri— culturalEnvironment，MinistryofAgricultureofP．R．China，Beijing100081，China；2．InstituteofSoil，FertilizerandWater—savinginAgri— culture，GansuAcademyofAgriculturalSciences，Lanzhou730070，China) Abstract：Theeffectsoffivefertilizationtreatmentsonthecommunitystructureandabundanceofammonia—oxidizingbacteria(AOB)were determinedbythecombinationoftemrinalrestrictionfragmentlengthpolymorphism(T-RFLP)andreal—timequantitativePCRinthegreen— housesoilsinWuweiCityofGansuProvince．，I’IleresultsbycloningandsequencingofamoA genefragmentsshowedthattheAOBcommuni— tyinsoilsforalltreatmentsconsistedoftwomajorgroups，i．e．Nitrosospiracluster3andNitrosomanascluster7．ThesequencesrelatedtoN一／ trosospiracluster3werepredominant．ThehighestabundanceoftheAOBbothin0—20cm and20-40cm soillayersweredetectedinthe 卜 tilizationtreatmentwhichisthehalfofthefarmerSconventionalamount(1／2MNPK)，whiletheamoAgenecopynumberwaswith9．95x10 and6．65~10 copies·g～soilrespectively．whichwas105．0％ and315．3％ higherres