利用RAMP-PCR技术对枸杞10个品种资源的分析.pdfVIP

中国患亏通攉 2011,27(16)：61—64 ChineseAgriculturalScienceBulletin 利用RAMP—PCR技术对枸杞 10个品种资源的分析 梁海永，刘兴菊，杨敏生 (河北农业大学林学院，河北保定071000) 摘 要：以枸杞为材料，建立基 因组DNA的有效提取方法，并对 l0个枸杞品种进行RAMP技术分析研 究。结果表明，利用 l0对引物共扩增出87个条带，其 中多态性条带53个；多态性条带比率33．3％～ 81．9％，10个枸杞品种间的遗传距离为0．1111-0．8333；研究表明，利用RAMP进行枸杞的品种DNA指纹 分析是可行的。 关键词：枸杞；基因组DNA；RAMP标记 ；种质资源 中图分类号 ：$567．1 文献标志码 ：A 论文编号 ：20l1-0289 AnalysisofLyclum chinenseVarietyRevealedbyRAM P—PCRM ethod LiangHaiyong，LiuXingju，YangMinsheng (ForestryCollege，AgriculturalUnive~ityofHebei，BaodingHebei071000) Abstract：TodevelopvalidmethodsofDNA extractionforLycium chinenseofrRAMPanalysisandresearch． Theresultshowedthat：tenprimerswereaDpliedtoamplification．A totalof87DNAbandsweredetected．53 bandsamongwhichwerepolymorphie．Therateofpolymorphicbandswas33-3％一81．9％．10Lycium chinense cuhivarsgeneticdistanceswerefrom 0．1l11to0．8333．Inthestudy．theRAMPmarkerscanbeusedofrthe studiesoffingerprintofLycium chinensesensitively． Keywords：Lycium chinense；RAMPmarker；genomicDNA；germplasm 0 引言 fragmentlengthpolymorphism，AFLP)等多种标记得到 枸杞 (Lyciumchinense)为茄科枸杞属的多年生落 了广泛应用 】。它主要 以DNA为分析对象、遗传多态 叶灌木，又名枸杞子，原产 中国，具有600多年的栽培 性表现为核苷酸序列的任何差异，包括单个核苷酸的 历史。同时枸杞果实具有保健功效而被列入药食 同源 变异[21；不受季节、环境的限制，数量多；多态性高，利 植物，是中国传统的名贵药材和出口创汇产品。但枸 用大量引物可完成覆盖基因组的分析。现已发展了多种 杞在长期的人工栽培和 自然繁衍中，由于各种原因，因 DNA标记技术，为不同的研究 目标提供了技术手段 【。 而在品种品系上出现了混杂，给枸杞品种选育、品种资 RAMP(random ~mplifiedmicrosatellitepolymorphism) 源鉴定、遗传多样性以及亲源关系进行研究和评价带 是利用5’锚定的低聚核苷酸GC(CA)4和GT(CA)4与 来了困难 。 RAPD引物发展的一种分子标记 。对基因组DNA中的 20世纪90年代 以来，随着分子遗传学技术的发 微卫星进行随机扩增 。它 比RAPD更能揭示物种的 展，尤其是PCR技术为核心的分子标记 ，如随机