Combretastatin A4 Phosphate对人晶状体上皮细胞增殖及迁移的影响.pdfVIP

第33卷 第 1期 中山大学学报 (医学科学版) V01．33 No．1 2012年 1月 JOURNALOFSUNYAT-SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Jan． 2012 CombretastatinA4Phosphate对人晶状体上皮细胞 增殖及迁移的影响 王 艳，朱丽媛，刘 畅，刘 良平，叶少碧 ，吴明星 ，刘奕志 (中山大学中山眼科中心／／眼科学国家重点实验室，广东广州 510060) 摘 要：【目的】研究CombretastatinA4Phosphate(CA4P)对晶状体上皮细胞系 SRA01／04增殖及迁移影响，初步探 讨其抑制细胞增殖的机制。【方法】以晶状体上皮细胞系SRA01／04为实验对象，设空白对照组及 CA4P组，分别以PBS或 1p~mol／LCA4P处理 15min，于0、24、48、72h后进行检测。通过WST一1法检测细胞增殖能力；划痕试验检测细胞迁移能力； AnnexinV—FITC／PI双染法检测细胞死亡方式：PI染色法检测细胞周期 ：免疫荧光法检测细胞骨架蛋白(一微管蛋白、F一肌 动蛋白)及细胞形态。 【结果】CA4P对细胞增殖的抑制作用呈时间依赖性，24、48、72h细胞相对增殖活性分别为 73％、40％、 34％(P0．05)。空白对照组细胞划痕面见大量细胞覆盖；CA4P组划痕面无细胞覆盖 ，细胞呈细小圆形，可见部分细胞脱落漂 浮。CA4P组24、48、72h细胞凋亡率为 19．7％、43．6％、72．2％，明显高于对照组(1．7％、2．2％、3．6％；P0．05)。CA4P组各时间 点G2／M期分布分别为30．3％、55．4％、70．8％，明显高于对照组(4．4％，9．0％，7．9％；P0．05)。CA4P组细胞内微管纤维丝状结 构消失，可见多核、巨核等有丝分裂障碍表现，但F一肌动蛋白未见明显变化。【结论】1~mol／LCA4P短时间作用于SRA01／04 晶状体上皮细胞可明显抑制其增殖和迁移，且作用呈时间依赖性。CA4P抑制细胞增殖可能机制是通过解聚微管蛋 白，诱导 有丝分裂停止而诱发SRA01／04细胞凋亡。 关键词：后发性白内障；晶状体上皮细胞；CombretastatinA4Phosphate；微管蛋白 中图分类号：R77 文献标志码：A 文章编号：1672—3554(2012)01—0008—08 EffectofCombretastatinA4PhosphateonProliferationandM igrationofLensEpithelialCells WANGYan，ZHULi—yuan，LIUChang，LIULiang—ping，YEShao-bi，WU Ming—xing ，LIUYi-zhi (StateKeyLaboratoryofOphthalmology，ZhongshanOphthalmicCenter，SunYat—senUniversity，Guangzhou510060，China) Abstract： O【bjective】TostudytheeffectofcombretastatinA4phosphate (CA4P) onproliferationandmigrationoflens epithelialcellslineSRA01／04anddiscussthemechanismonCA4Pinhibitingcellproliferation．M【ethods】Theexperimentalobject waslensepithelialcellslineSRA01／04． Wedividedthem intothecontrolgroupandCA4Pgroup， treatingrespectivelybyPBSor lumol／LCA4Pfor15min．Thetestingtimewere0h，24h，48h，and72hafterdrug—treating．Cellproliferationcapabilitywas detectedbyW ST一1．Cellmigrationwasdet