BrdU免疫荧光染色方法的改进.pdfVIP

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60 ·实验研究 · February2013,Vo1.11,No.6 准,标准中薄层色谱为芦丁的鉴别。本文参照 《中国药典》2010年版 一 部独一味药材及其制剂标准,对独一味药材进行定性鉴别。 1仪器与试药 1.1仪器 电子天平METTLERXS205DU。 1.2对照品与试药 对照品:山栀昔甲酯对照品 (批号111873-201001,中国药 品生物制品检定研究院)、8一O一乙酰山栀苷 甲酯对照品 (批号 111872—201001,中国药品生物制品检定研究院)、独一味对照药材 (批号121026—200604,中国药品生物制品检定研究院)。 试药:独一味软胶囊,内蒙古康源药业有限公司 (0.60g/粒), 批号:100128、100129、100130 硅胶G薄层板:青岛海洋化工。其他试剂均为分析纯。 2方法与结果 图1薄层色谱[1内蒙古康源药业有限公司 (100128);2内蒙 2.1对照药材溶液的制备 古康源药业有限公司 (100129);3 内蒙古康源药业有限公司 取独一味对照药材lg,加70%甲醇20mL,加热回流30min,滤过, 滤液蒸干,残渣用乙醇5mL溶解,滤过,滤液作为对照药材溶液。 (100130);4独一味对照药材;5对照品 (自下而上为山栀苷甲 2.2对照品溶液的制备 酯、8一O一乙酰山栀苷甲酯)] 取山栀昔甲酯对照品、8-O.乙酰山栀苷甲酯对照品,加乙醇制成 一 部Ⅲ中独一味药材及其制剂标准均为独一味药材及所含对照品山栀 每lmL各含0.5mg的混合溶液,作为对照品溶液。 苷甲酯、8-0一乙酰山栀苷甲酯的薄层色谱鉴别。为了与药典统一,本 2_3供试品溶液的制备 文建立了独一味软胶囊中独一味药材的薄层色谱鉴别。 取本品内容物1g,加乙醇5mL,超声处理30min,滤过,滤液作 3.2展开系统的选择:药典中独一味药材的薄层色谱展开条件为: 为供试品溶液。 三氯 甲烷一甲醇 (4:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以磷钼酸 2.4展开剂与显色条件 试液,在105℃加热至斑点显色清晰。经试验,斑点显色不够清晰。 吸取供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液各5L,分别点于同 本文将薄层色谱展开条件更改为:以三氯甲烷一甲醇一水 (13:6:2) 一 硅胶G薄层板上。以三氯甲烷一甲醇一水 (13:6:2)IO~C以下放置的 IO~C以下放置的下层溶液,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105~C加热至斑 下层溶液,喷以1 硫酸乙醇溶液,在105~JI]热至斑点显色清晰。 点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的 2.5结果 位置上,显相同颜色的斑点。本方法斑点显色清晰,重现性较好 ,能 供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上 , 确证独一味药材的特征。 显相同颜色的斑点。见图1。 参考文献 3讨 论 1【] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[s】.北京:中国医药 3.1原标准中为总黄酮芦丁的薄层色谱鉴别, Ⅸ中国药典 2010年版 科技出版社,2010. BrdU免疫荧光染色方法的改进 杨 燕 严小新 李 明 邓思浩 薛志琴 李志远 (1中南大学基础医学院人体解剖学与神经生物学系,湖南 长沙410013;2湘潭职业技术学院,湖南湘潭411100;

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