定向进化提高嗜热拟青霉J18耐热β-1,3－1，4－葡聚糖酶在酸性条件下的催化能力.pdfVIP

生 物 工 程 学报 ChinJBiotech2011，December25；27(12)：1797—1804 journals．irn．ac．cn ChineseJournalofBiOtechnOlOgy ISSN 1000-3061 cjb@im．ac．on ~2011CJB，Allrightsrese~ed． 定向进化提高嗜热拟青霉J18耐热13．1,3．1，4．葡聚糖酶 在酸性条件下的催化能力 李一男1，贾会勇 ，闫巧娟2江正强 ，杨绍青 1中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京 100083 2中国农业大学工学院，北京 100083 摘 要：应用定向进化技术提高了嗜热拟青霉Paecilomycesthermophila儿8耐热D．1，3-1，4．葡聚糖酶 (PtLic16A)在酸 性条件下的催化能力。结合易错 PCR和DNA改组的方法，构建了B．葡聚糖酶的突变体文库；利用刚果红染色法建立 了阳性克隆的高通量筛选体系。筛选得到的突变酶PtLic16AM1的反应