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第 50卷第 17期 湖北 农业 科 学 Vo1.50No.17
2011年 9月 HubeiAgriculturalSciences Sep.,2011
根癌农杆菌介导的小麦成熟胚遗传转化研究
李砚川
(华中农业大学生命科学技术学院,武汉 430070)
摘要 :以小麦栽培品种郑麦9023成熟胚半胚愈伤组织作为受体材料 ,通过农杆菌菌株 GV3101将 目的基
因导入受体材料并对转化过程进行了优化。考查了MS培养基中NH4N03浓度对组织培养的影响,以及
高渗处理对转化过程的作用 。结果显示 ,2.5倍的NHNO 浓度可明显提高愈伤组织再生率 ,高渗处理对
愈伤组织再生率的提高也有帮助。经抗性筛选和PCR鉴定 ,共得到 了4株转基因小麦植株 ,平均转化效
率为 0.18%。
关键词 :小麦;成熟胚 ;农杆菌;转化
中图分类号:$512.1 文献标识码 :A 文章编号:0439—8114(2011)17—3637—03
Agrobacterium-mediated Transformation ofW heatM atureEmbryo Tissues
LIYan-chuan
(SchoolofLifeSciencesandTechnology,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan 430070,China)
Abstract:Agrobacterium-mediated transformationwasconductedbyAgrobacteroum strain GV3101using explantsderived from
wheatmature embryosofZhengmai9023 asreceptor;and the transfomr ation processwasoptimized.The effectofNH4NO3
concentration andosmotictreatmentwasstudied.Theresultshowed that2.5 timesofNH4N03concentration in callusinduction
medium and osmotic treatmentcould increase the regeneration rate ofcallus.According to hte resistance identification and
PCR identification.4 transgenicwheatplantswereobtained withhte averagetransformation efficiencyof0.18%.
Key words:wheat;mature embryo;Agrobacterium ;transformation
1997年 .Cheng等…首次用农杆菌介导法获得 杆菌介导的小麦成熟胚遗传转化体系奠定基础。
可育的转基因小麦植株 。几年后,夏光敏等_2]、叶兴
1 材料与方法
国等[3]也分别报道利用农杆菌法获得 了转基 因小麦
植株 随后越来越多的研究机构对农杆菌介导的小 1.1 试验材料
麦遗传转化方法作了更加细致与深入的研究[].使 小麦品种郑麦 9023以及质粒 pTRAkc—BAR—
得该方法的转化效率不断提高 但上述报道大多用 UT—Rs—D2和根癌农杆菌 (Agrobacteium tu,~fa-
小麦幼胚及其诱导产生的愈伤组织作为转化受体 . cie128)GV3101均
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