铜绿假单胞菌产吩嗪类色素的分离纯化及其对赤潮生物生长的影响.pdfVIP

( ) 第 43 卷 　第 4 期 复旦学报 自然科学版 Vol. 43 No. 4 2004 年 8 月 Journal of Fudan University (Natural Science) Aug. 2004 　　文章编号 (2004) 铜绿假单胞菌产吩嗪类色素的分离纯化 及其对赤潮生物生长的影响 1 1 2 1 1 1 龚良玉 , 王修林 , 李雁宾 , 张传松 , 梁生康 , 祝陈坚 ( 1. 中国海洋大学 化学化工学院 , 青岛 　266003 ; 2. 中国海洋大学 生命学院 , 青岛 　266003) 摘 　要 : . 从胜利油田被原油污染的土壤中富集分离得到菌株 O22 ,经鉴定属于铜绿假单胞菌. 菌株 O22 在海 水培养基中能生长良好且能分泌色素类代谢产物. 细菌发酵液经氯仿萃取并通过硅胶色谱柱分离得到桔黄色和 蓝色两种色素. 抑藻实验结果表明 :黄色色素在较低浓度下对赤潮异湾藻以及具齿原甲藻 020101 两种典型的 ( - 1 ) ,而在相同实验条件下 ,对非赤潮生物青岛大扁藻 赤潮生物的生长表现出了明显的抑制作用 EC50 2 mg ·L ( - 1 ) 的生长影响不大. 蓝色色素在低浓度下对藻细胞生长影响不明显 EC50 50 mg ·L ,但在碱性条件下可经水 解转变为黄色色素. 可见 ,该细菌的色素代谢产物在赤潮治理中具有很好的应用前景. 进一步借助紫外以及 GC MS 测试手段对抑藻物质进行了结构分析 ,结果表明两种色素为吩嗪类化合物 ,并认为黄色色素的抑藻作用是由 于其中含有 1羟基吩嗪. 关键词 : 铜绿假单胞菌 ; 代谢产物 ; 吩嗪 ; 赤潮生物 ; 抑藻 中图分类号: X55 　　 文献标识码 : A 　　 吩嗪类色素物质可由多种微生物如细菌1 5 、放射菌6 、粘细菌等在一定的培养条件下产生 ,这些色 素类物质包括 1羟基吩嗪、绿脓菌素、氧绿菌素、铜绿菌素 A 、铜绿菌素B 、2羟基1羧基吩嗪、1羧基吩嗪 等. 目前研究较多的是铜绿假单胞菌产生的多种吩嗪类色素1 ～3 . 研究表明 ,这些色素具有较强的抑菌活 性7 ～9 . 部分色素对淡水生态体系中藻细胞生长的抑制作用也得到了初步的研究1 ,7 ,但相关的工作仅集 中于淡水生态体系而且多为定性探讨. 近年来 ,随着全球各沿海国家赤潮发生频率的逐年增加和发生区域 的不断扩大10 ,寻找有效而且对环境无害的控制赤潮的方法已成为当前迫切需要解决的海洋环境问题. 其中利用细菌释放特异性或非特异性的胞外物质来抑制藻细胞生长引起了众多研究者的关注11 ～15 . 本 实验在海水培养基中培养铜绿假单胞菌 O22 ,对其代谢产物进行了分离提纯 ,并以赤潮异湾藻和具齿原 甲藻020101 两种典型赤潮生物为目标生物 ,首次考察了该细菌所产色素类物质对海洋赤潮生物生长的 影响. 1 　材料与方法 1 . 1 　菌株的培养 菌株 O22 由本实验室从胜利油田被原油污染的土壤中富集分离得到,经鉴定属于铜绿假单胞菌 ( Pseudomonas aeruginosa) . 菌株 O22 培养条件 :蛋白胨 20 g ;氯化镁 1. 4 g ;