补阳还五汤对脓毒症大鼠脾细胞凋亡的实验研究.pdfVIP

·486 · 中国危重病急救医学 2Ol1年 8月第 23卷第 8期 ChinCritCareMed，August2011，Vo1．23，No．8 · 论 著 · 补阳还五汤对脓毒症大鼠脾细胞凋亡的实验研究 张畔 郭聪芳 骆宁 王兵 刘剑虹 徐新女 【摘要】 目的 通过观察脓毒症大 鼠脾脏 T、B淋 巴细胞数量、细胞凋亡及 Bcl一2、Bax蛋 白表达的变化 ， 探讨补阳还五汤对脓毒症大鼠免疫功能的影响及其作用机制。方法 按随机数字表法将 180只雄性Wistar 大 鼠分为假手术组 (30只)、模型组 (50只)及补阳还五汤治疗组 (50只)和防治组 (50只)。采用盲肠结扎穿孔 术 (CLP)制备脓毒症大 鼠模型。治疗组于术后 30min、防治组于术前 3d灌 胃补阳还五汤浓缩液 (含生药 1g／m1)15ml／kg，每 日1次。分别于术后 6、12、24、48、96h处死大鼠，观察各组动物脾脏形态学变化，脾 T、B 淋巴细胞，凋亡细胞，Bel一2、Bax蛋 白表达的变化。结果 光镜下观察CLP术后大 鼠脾脏 白髓逐渐萎缩，淋巴 小结破坏，损伤的严重程度为模型组治疗组防治组。与假手术组比较，模型组术后各时间点CD4T淋巴 细胞、CD40B淋巴细胞、Bcl一2蛋 白表达明显降低，凋亡细胞、Bax蛋 白表达明显增加，均于 24h达谷值或峰 值(均为积分吸光度 (A)值：CD4T淋巴细胞：18．28士4．57比98．6O±18．18~CD40B淋巴细胞：26．96±6．26 比 104．87士3O．97；Bcl一2蛋 白表达 ：2O．23±11．75比 149．67±5．24；凋亡细胞 ：241．75土44．79比 14．67士 5．24；Bax蛋 白表达：128．75士44．79比5．34土4．26，均P0．013；而 CD8 淋巴细胞无明显变化。与模型组比 较，补阳还五汤治疗组和防治组各时间点脾脏 CD4 T淋巴细胞、CD40B淋巴细胞明显升高，凋亡细胞、Bax 蛋 白表达明显减少，而 CD8T淋巴细胞、Bcl一2蛋 白表达无明显变化；防治组治疗效果优于治疗组 ( 值： cD4T淋巴细胞：94．12±15．45比72．37±8．00；CD40B淋巴细胞：9O．46士13．34比55．66±4．23；凋亡细 胞 ：27．63土9．91比4O．83土16．09；Bax蛋 白表达 ：11．63±5．91比30．83±16．09，P0．05或 尸0．01)；至 96h时各指标逐渐接近假手术组水平 。细胞凋亡与Bax呈显著正相关 (r一0．522，P一0．000)，与 Bcl一2呈显著 负相关 (r一一0．659，P一0．000)。结论 补 阳还五汤通过减少脾脏 CD4T淋 巴细胞、B淋 巴细胞凋亡 ，从而 改善脓毒症时的免疫抑制 ；这可能与补阳还五汤减弱Bax对细胞凋亡的促进作用相关。 【关键词】 补阳还五汤； 脓毒症 ； 脾脏； 凋亡 EffectofBuyangHuanwutdecoction (补阳还五汤)onapoptosisofsplenocytesinratswithsepsis ZHANG Pan，GU0 Cong—fang，LUO Ning，WANG Bing， U Jian—hong，X Xin—nil．Emergency Medical ResearchInstitute，TianjinFirstCentralHospital，Tianjin300192，China Correspondingauthor：ZHANGPan，Email：congfang83012泡 j63．corn [Abstract] Objective ToobservethechangeinnumberofspleenT 1ymphocyte，B lymphocyte， apoptoticsplenocytesandtheexpression ofBcl一2andBaxproteininratswithsepsis；tostudytheeffectof BuyangHuanwudecoction (BYHWD，补 阳还五汤)ontheimmune{unctioninratswithsepsis．Methods 0nehundred andeightyhealthymaleWistarratswererandomlydividedintofourgroups：sham operation group (一 30)，modelgroup 一50)，BYHWD treatmentgroup 一50)