共轭三烯酸对人胶质瘤U251细胞的增殖抑制作用.pdfVIP

· 1416 · 2011年9月第28券第 9 2011．V01．28．No．9 · 牢申经 夕卜科 · 共轭三烯酸对人胶质瘤 U251细胞 的增殖 抑制作用 扈及雷 王修杰 周培志 马卫朝 姜曙 摘【要】 目的 探讨共轭三烯酸 (TCLA)对人胶质瘤细胞的增殖抑制作用及作用机制。方法 用噻唑蓝(MrrI1)比色法、克隆形成试验、5一溴脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)掺人试验研究TCLA对人脑胶 质瘤细胞的增殖抑制作用；Hoechst33342／PI双染法、流式细胞术检测细胞凋亡指数和周期分布；逆 转录．聚合酶链反应 (RT—PCR)检测凋亡相关基因腺苷二磷酸核糖转移酶 1(ADPRTL1)、细胞色素 P4501A1(CYP1A1)，过氧化物酶增殖体激活受体一^y(PPAR一^r)的表达。结果 共轭三烯酸对人胶质 细胞瘤 (U251)有明显抑制作用 ，呈剂量一时间一效应关系(P0．05)。克隆形成下降，40 m0L／L TCLA可完全抑制克隆形成。BrdU标记从(91．6±3．6)％下降到(14．4±4．4)％(P0．05)，Hoechst 33342／PI双染试验，凋亡细胞增加 (P0．05)。流式细胞仪检测显示，细胞凋亡指数从 (7．3± 1．2)％升高到(34．2±2．4)％(P0．05)，G。／G 期细胞比例增加，S期细胞比例减少 (P0．05)； RT—PCR结果显示，凋亡相关基因ADPRTL1、CYP1A1、PPAR一mRNA表达增强 (P0．05)。结论 TCLA对人脑胶质瘤细胞具有增殖抑制和凋亡诱导作用，其作用机制可能与抑制肿瘤细胞 DNA合 成、细胞周期阻滞、上调凋亡相关基因(ADPRTL1、CYP1A1、PPAR一)表达有关。 【关键词】 共轭三烯酸；胶质瘤；增殖 InhibitoryeffectsofconjugatedtrienoicfattyacidsonproliferationofhumanglioblastomaU251 cells／nvitro HUJt—lei。WANGXiu-jie，ZHOUPei-zhi，MAWei—chao JIANGShu．Departmentof Neurosurgery， tChinaHospital，Sichuan University，Chengdu610041， ina Correspondingauthor：JIANGShu，Emaif：jiangshu56@sina．com A【bstract】 0bjective Toinvestigatetheeffectofconjugatedtrienoicfattyacids(TCLA)onpro— liferationofhumanglioblastomaU251ceilsandtheactionmechanism．Methods Glioblastomacellswere tested nvitrobymethylthiazoltetrazolium (MTF)，colonyformationinhibition，BrdU incorporationafter treatmentwithTCLA．TheapoptoticcellswereassayedthroughHoechst33342／propidium iodidestaining andcellcycleanalysisbyflowcytometry(FCM)，andtheexpressionofADPRTL1，CYP1A1andPPAR一 genesweredetectedbyusingreversetranscription—polymerasechainreaction(RT—PCR)．Reslllts After TCLAtreatment．theproliferationofU251cellswasinhibitedinadose—andtime—dependentmanner(P 0．05)．colonyformationdecreasedsignificantly(P0．05)andBrdU