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中华 实验外科杂志2011年 9月第 28卷第 9期 ChinJExpSurg．September2011，Vo1．28，No．9 · 1475 ·
· 实 验 研 究 ·
骨髓间质干细胞通过影响 PI3K／Akt信号
通路抑制肝星状细胞 的增殖
姚志成 胡昆鹏 陈思 钟跃思 方和平 潘卫 东 许瑞云 邓美海
【摘要】 目的 探讨在体外非接触共培养条件下，大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)如何调控肝星
状细胞(HSCs)的增殖。方法 实验组将 MSCs／HSCs按 2x10／2×10(细 孔)的比例接种于
Transwell共培养板上下层，建立非接触共培养体系；对照组为 HSCs(2×10细胞／孔)单独培养；阳性
对照组为加入抑制剂LY294002(20I~mo]／m1)观察抑制效果。共培养24、48、72h后应用流式细胞仪分
析细胞周期，Westernblot检测HSCs的P—Akt及Akt蛋白的表达。结果 共培养2，4、48、72h后 HSCs
的S期细胞与对照组比较明显减少，且抑制程度呈时间依赖性 (11．244-0．3415．734-0．7619．14±
0．9123．16±1．80，P0．05)；JJH人LY294002后可明显增加共培养组抑制效果，与单独使用抑制剂比
较S期细胞减少更加明显 (8．2-4-0．811．7±1．6，P0．05)；共培养组及共培养+抑制剂组p-Akt蛋
白表达较单独培养组均显著下调，而Akt蛋 白表达差异无统计学意义 (P0．05)；共培养 +抑制剂
组较共培养组 p-Akt蛋 白表达下调。结论 MSCs可 明显抑制 HSCs的增 殖，可能是通过影响
PI3K／Akt信号通路达到这一作用，磷酸化的Akt蛋白在其中起关键作用。
【关键词】 肝星状细胞； 骨髓问充质干细胞 ；PI3K／Akt信号通路；共培养
Bonemarrow mesenehymalstem cellscan inhibithepaticstellatecellsproliferation byinfluencing
1)13K ／ singalpathway YAO Zhi—cheng。HU Kun-peng，CHEN si，ZHONG Yue—si，FANG He—
ping PANWet—d。ng，XURui—yun，DENGMei—haiDepartmentofHepato—biliarySurgery．theThiraAfrill—
ateHospitalofSunYet—senUniversity，Guangzhou51D6jD， ina
Correspondingauthor：D五ⅣlGMei一 ．Entail：drdmh@medmail．con．cn
【Abstract】 objective Toinvestigatethemechanismofbonemarrowmesenehymalstemcells
(MSCs)regulatingtheproliferationofhepaticstellatecens(HSCs)undernon—contactco．culturenvitro．
Methods RatMSCs／RatsHSCswereseededinproportion (2×10／2×10 cells／wel1)intheTranswell
co—cultureplateastheexperimentalgrouptoestablishtheupperandlowerdoublecellco．culturesystem．
HSCswereseparatelycultured (2×10 cell#wel1)inawellascontrolgroup．IYl294o02astheinhibitorof
PI3K／Aktsignalpathwaywasaddedtoco—culturegroupandcontrolgrouprespectively(20p~naol／m1)，which
servedasthepositivecontrolrgoup．Cellcyclewasdeterminedatdifferentco—culturetimepoints(24．48，
72h byusingflow cytometry．Th p-AktandAktproteinexpressi
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