血液痕迹中DNA抽提方法的比较与优化.pdfVIP

第 41卷 第 5期 河南大学学报 (自然科学版) Vol_41 No．5 2O11年 9月 JournalofHenanUniversity (Natura1Science) Sep．2011 血液痕迹 中DNA抽提方法 的比较与优化 齐 麟 ，郜 杨。，向志明。，张 彤 ¨ (1．中山大学 生命科学学 院，广州 510275；2．铁道警官高等专科学校 治安系 ，郑州 450003； 3．福州 大学 生命科学研 究所 ，福州 350108；4．河 南大 学 生命 科学学院 ，河南 开封 475004) 摘 要 ：本文总结 了 6种 DNA抽提方法 ，进行部分优化后对长 时间离体血液痕迹 中的DNA进行提取对 比．结果 表 明：优化后 的CTAB法可 以简单 、快速 、高效地从凝血块儿 中获得高纯度 的DNA，并可满足后续 PCR扩增和分 子标记等分子 遗传 学研究． 关键词 ：血液痕迹 ；DNA抽提 ；CTAB；PCR；ISSR 中图分类号：Q7 文献标志码 ：A 文章编号：1003—4978(2011)05—0505—06 Comparison andOptim ization 0fDNA Isolation M ethodsfrom BloodTrail QILin ，GAO Yang ，XIANG Zhi—ming。，ZHANG Tong“ (1．CollegeofLi Science，Sunyat-senUniversity，Cruangzhou510275，China；2．DepartmentoJPublicSecurity RailwayPoliceCollege，Zhengzhou450003，China；3．Institute0_，’LifeScience，FuzhouUniversity， Fuzhou350108，China 4．CollegeofLifeScience，HenanUniversity．HenanKaifeng475004，China) Abstract：SixmethodsofDNA isolationfrom bloodtrailwereperformedandanalyzedinthispaper．Highlypurified DNA wassimply．fastandefficientlyisolatedfrom thebloodtrailusingtheoptimizationCTABapproach．According toPCR andISSR analysis．theoptimization CTAB method wassuitableto extractthegenomicI)NA from blood trail． Keywords：bloodtrail；DNA isolation；CTAB；PCR；ISSR 脱氧核糖核酸 (deoxyr onucleicacid，DNA)是人类遗传信息的基本载体 ，其遗传标记终身不变 ，记载 了个人遗传的全部生物学信息 ]，目前被广泛地应用于公安业务 的诸多领域 ]．DNA 的提取是分子生物 学研究的基础技术 ，纯度高、结构完整 的DNA是进行亲子鉴定、个体身份识别等研究所必需的条件 。]．血 液作为维持人体内环境稳定的基础介质 ，包含 了人类全部 的遗传信息 ，同时由于其取材简单、可再生 、少量抽 取后不会对个体造成伤害等特点而成为法医遗传学 中 DNA 提取 的首选样本 ]．目前常规的 DNA提取方 法主要是针对抗凝血 (血液抽取后加入抗凝剂)或新鲜抽取的血液样品．法 医实践 中，经常要提取 已发生凝血 现象的长时问离体血液样本中的DNA．由于红细胞凝集及 DNA 降解等原 因，长时间离体血液样本 中DNA 的抽提效果十分不理想，国外产专 门试剂盒的成本又过于昂贵，不便于大规模、高通量分析．为了解决这一难 题 ，作者拟进行动物实验 ，将 目前常见的各种 DNA提取方法引入