野生新麦草种质醇溶蛋白遗传变异分析.pdfVIP

第 2O卷 第 4期 草 业 学 报 311— 315 VoL2O，No．4 ACTA PRATACUITURAE SINICA 2011年 8月 野生新麦草种质醇溶蛋 白遗传变异分析 陈仕勇，马啸，张新全 ，武小龙 (NI川农业大学动物科技学院草业科学系，四川 雅安 625014) 摘要 ：采用酸性聚丙烯酰胺凝胶 电泳技术 (A—PAGE)对来 自中国新疆、俄罗斯西伯利亚及蒙古等地 的35份野生新 麦草种质进行醇溶蛋 白的遗传变异分析 ，获得如下结果，1)电泳共检测到 37条醇溶蛋 白条带，多态性条带 比率高 达 100 ；2)种质 问遗传相似系数变幅为 O～o．8276，平均值为 0．4509，表 明供试材料具有丰富的醇溶蛋 白遗传多 样性 ；3)聚类分析将供试材料分成 5类 ，相 同或者相似生态地理来源 的材料能够聚在一起 ，表 明醇溶蛋 白带谱与其 地理分布具有一定的相关性 ；4)种质 间的 Shannon多样性指数 H =0．5796，类群平均多样性指数 H 一 0．4835，其 中类群内和类群间的遗传变异分别为83．42 和 16．58 ，这可能与新麦草异花授粉 的繁育方式有关 。 本研究结果将为新麦草种质资源的保护和利用提供理论依据 。 关键词 ：新麦草 ；种质 ；醇溶蛋 白；遗传变异 ；资源保护 中图分类号 ：Q943；$543 ．903 文献标识码 ：A 文章编号 2011)04—0311-05 新麦草 (Psa￡ r0s＆ ．ysjuncea)是禾本科小麦族新麦草属的重要物种 。它是一种多年生、异花授粉的二倍 体 (2n一2x=14)禾草 ，原产于中亚和西伯利亚 ，在我 国主要分布在新疆及内蒙古等地 ]。新麦草分蘖多，叶量 大 ，抗旱、耐牧、耐盐碱，是一种优 良的放牧刈割兼用型牧草 ，在草地畜牧业和草地生态建设 中发挥了重要作用_2。 我 国在 2O世纪 9O年代审定登记了 2个新麦草野生栽培品种 “山丹”和 “紫泥泉”。 目前 ，我国在新麦草育种方面 的研究还较落后 ，国外在新麦草多倍体材料创制和转基 因育种方面已取得了进展_3]。种质资源是遗传育种研究 的基础，对种质资源遗传变异等背景的了解程度将直接影响到育种的进程 ]。目前关于新麦草野生种质资源遗 传变异方面的研究还较少 ，且在 已报道 的野生种质和栽培 品种遗传分析 中供试 的种质较少 ，地 区的代表性不 强 ]。 麦醇溶蛋 白是麦类植物种子胚乳 中的主要贮藏蛋 白，经 电泳分离后的带纹多少及组合方式完全受基 因型控 制，可 以构成物种或者 品种 的指纹。醇溶蛋 白已经在 品种鉴定 、种问亲缘关系 以及遗传多样性分析 中广泛运 用[10,11]。而 目前关于新麦草种质醇溶蛋 白的遗传变异研究还鲜有报道 。本研究通过酸性聚丙烯酰胺凝胶 电泳 (acidpolyacrylamidegelelectrophoresis，A—PAGE)技术对来 自中国新疆 、蒙古及俄罗斯等地 的 35份野生新麦 草种质进行醇溶蛋 白遗传变异及地理分化研究，旨在为新麦草种质资源的合理保护和开发利用提供理论参考 。 1 材料与方法 1．1 供试材料 2009年课题组从美 国国家遗传资源库 (NPGS，usDA)获得 了35份野生新麦草种质 ，它们分别收集 自中国 新疆 (18份)，俄罗斯西伯利亚 (13份)以及蒙古(4份)等地 区。供试材料的详细情况见表 l所示。 1．2 研 究方法 1．2．1 样品提取 每份种质随机取 20粒种子 ，磨成粉末并称重 。然后将其转入 1．5mL离心管 ，按照 1mg加 5 L的比例加入提取液 (2-氯乙醇 25 +甲基绿 0．05 )，室温浸提过夜 ，使用前 10000r／min离心 15min。 1．2．2 A—PAGE分析 根据 国际种子检查协会 ISTA(1986)颁布的酸性 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (pH 3．2)标准程 序口 ，采用 DYCZ一24F型电泳槽 (北京六一仪器厂)进行电泳 ，恒压 500V，恒温 10～15。C，电泳 3h。试验以加拿 大春小麦品种 M‘arquis’(Triticumaestivum CV．Marquis)为对照