二茂铁标记D NA 电化学探针的研制及性质研究.pdfVIP

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2017-09-12 发布于山东
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二茂铁标记D NA 电化学探针的研制及性质研究.pdf

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V o l. 22 高等学校化学学报　 N o. 9　 2 0 0 1 年 9 月　　　　　　　CH EM ICAL JOU RNAL O F CH IN E SE UN IV ER S IT IE S　　　　　　　　　 1492～ 1495　二茂铁标记D NA 电化学探针的研制及性质研究徐　春　蔡　宏　何品刚　方禹之 (华东师范大学化学系, 上海 200062) ( ) ( ) 摘要　以乙基 3二甲基丙基碳化二亚胺盐酸盐 ED C 为偶联活化剂, 利用缩合反应分别将电化学活性物质氨基二茂铁( , ) 和醛基二茂铁( , ) 成功地标记在变性小牛 Am inoferrocen e A FC F errocen ecarboxa ldehyde FCA 胸腺DN A 片段上, 制备成二茂铁标记DN A 探针. 分别采用电化学、紫外、红外光谱等方法研究了二茂铁标记DN A 探针的性质, 计算了二茂铁的标记效率, 变性小牛胸腺DN A 的反应效率以及二茂铁化合物与变性小牛胸腺DN A 的反应比率. 实验表明, 氨基二茂铁和醛基二茂铁与DN A 上的磷酸基是以 1 ∶1 比率进行的反应, 该标记反应不影响DN A 链碱基的紫外吸收, 二茂铁标记DN A 探针在石墨电极上有良好的电化学响 ( ) 应. 将制备好的二茂铁标记DN A 电化学探针置于冰箱中冷冻温度低于- 15 ℃ 保存 3 个月后用于测定, 峰电流仅下降 12%. 关键词　二茂铁; 标记反应; DN A 电化学探针 ( ) 中图分类号　 657　　　　文献标识码　　　　　文章编号　025 10790 200 1 O A [ 1 ] 基因工程日益受到重视, 而核酸的结构分析和测试是基因工程中首要解决的问题之一 , 核酸的 [2 ] [3 ] 分子杂交技术是解决这一问题的重要手段 . 通常是将单链DN A 小片段用同位素、酶、荧光分子、 [4 ] [ 5 ] 化学发光试剂或电化学活性物质予以标记,