黄酮类化合物逆转HeLa 细胞株多药耐药性.pdfVIP

维普资讯 襁 鳖 2004Jul JF ， v。l38 N。3 ujianMedUniv ’… 279 黄酮类化合物逆转HeLa细胞株多药耐药性 刘玉雯，余祥彬 摘要： 目的 探讨黄酮类化合物对人类子宫颈癌HeLa细胞多药耐药(MDR)的逆转作用。 方法 采用 ， WsT一1法鉴定多药耐药亚系Hvrl00—6细胞对抗癌药物长春碱、阿霉索、柔红霉素及5一氟尿嘧啶(5一Fu)的耐药性， 观察槲皮素等黄酮类化合物对其耐药的逆转作用；采用RT—PCR法检测联用黄酮类化合物前后Hvrl00—6细胞 mdrlmRNA表达水平。 结果 Hvrl00—6细胞与亲本株HeLa细胞相 比，对长春碱、阿霉素、柔红霉素均表现出显 著耐药性 O．001)，耐药倍数分别为496，52和198倍。加入槲皮素(10~mol／L)的长春碱、柔红霉素、5一Fu组与 相应浓度单用药物组 比较 ，其细胞抑制率差异均有显著性(尸O．05)，但细胞mdrlmRNA表达量在使用槲皮素前 后没有变化。 结论 槲皮素对长春碱、柔红霉素、5-Fu的细胞毒性有增敏作用，可逆转HeLa细胞耐药株对部分化 疗药物的多药耐药 。 关键词：HeLa细胞；黄酮类化合物；槲皮素；抗药性，多药 中图分类号： R965 文献标识码： A 文章编号：1672—4194(2004)03—0279—04 肿瘤细胞先天存在的或经化疗药物诱导后产生 (DXR)、柔红霉素 (DNR)及 5一氟尿嘧啶 (5一Fu)， 的对一种以上的化疗药物无应答的现象，称为多药 (WakoPureChemicalIndustries，Ltd，日本)。 耐药 (multidrugresistance，MDR)。研究表明，肿瘤 1．3 化疗药物药敏试验 将处于生长期的HeLa 细胞耐药基 因mdrl编码的P一糖蛋白(P—glycopro— 细胞和Hvrl00—6细胞制成1×10m‘L 悬液，接种于 tein，P—gP)的过度表达是导致肿瘤细胞MDR的重 96孔培养板内，每孔100L，37℃，体积分数为0．05 要原因叫。目前对MDR的逆转的研究，多采用化疗 的CO。饱和湿度的培养箱 内培养，24h后弃去培养 增敏剂、药物化学修饰、载体技术等，对植物药的研 液上清，加入含有长春碱、阿霉素、柔红霉素及5-Fu 究较少 。本研究拟通过体外实验观察黄酮类化合物 的培养液，每孔100 L，每种药物以4倍稀释的方法 槲皮素(Quercetin)、金雀异黄素(Genistein)及黄芩 由高到低设置 11个系列含药浓度及一个不含药仅 甙 (Baicalein)是否逆转HeLa耐药株的MDR、逆转 含培养液的对照 (起始浓度分别为4，16，4及 1024 效果及其可能的机制 。 ~mol／L)，每个浓度或空白的培养液重复4个平行孔 (=4)，并另设4个只加同量培养液的无细胞空白 1 材料与方法 孔。药物作用72h后，使用CellCountingKit试剂盒 1．1 细胞培养 HeLa细胞株 (DainipponPharma— (DojindoLaboratories，日本)，采用WST一1比色法 ceuticalCorp，日本)在含有 10 小牛血清及 100 测定光密度(D)并计算相对细胞数[z]。方法：弃去培 mg／L卡那霉素的DMEM (InvitrogenCorp，Carls— 养液，每孔加入WST一1试液110~L(WST一1试液10 bad，美国)培养液中培养 ，并置于37℃，体积分数为 +DMEM培养液 100 L)，放置于 37℃培养箱 0．05的COz饱和湿度 的培养箱 内备用。耐药株 中，4h后，微孔板式全 自动酶标仪 (SjeiaAuto Hvrl00—6(Kobe