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中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2012, 34(8): 767–774 http ://www.cj
锦鲤鳍条组织细胞系的建立及其生物学特性
肖 艺 曾令兵 徐 进 周 勇*
( 中国水产科学研究院长江水产研究所, 武汉430223)
摘要 采用组织块移植培养技术, 对来源于锦鲤(Cryprinus carpiod)鳍条组织的细胞进行原
代培养, 建立了锦鲤鳍条组织细胞系, 已稳定传代60多次, 命名为Koi-Fin 。锦鲤鳍条组织细胞为成
纤维样细胞, 最佳培养基为MEME, 最适血清体积分数为10%, 最适培养温度为25 ºC, 群体倍增时间
±
为43.5 h 。该细胞经液氮冷冻保藏12个月后采用台盼蓝染色, 约(80.2 1 5.84)%的细胞具有细胞活性,
复苏细胞生长旺盛。细胞染色体分析显示, 第16代锦鲤鳍条组织细胞的染色体数目为正常二倍体
2n= 100, 第40代细胞的染色体众数为52 。病毒敏感性试验结果表明, Koi-Fin 细胞系对锦鲤疱疹病
毒(Koi Herpesvirus, KHV)敏感, 可产生典型细胞病变效应, 病毒滴度为107.86±0.51 TCID50/mL 。针对锦
鲤疱疹病毒胸苷激酶(thymidine kinase, TK)基因设计特异性引物进行PCR检测, 可扩增出病毒靶基
因片段。
关键词 锦鲤; 鳍条组织; 细胞系; 生物学特性; 病毒敏感性
(Cryprinus carpiod), “ ” “ 了可连续传代培养的锦鲤鳍条细胞系(Koi-Fin), 并
锦鲤 又称 绯鲤 、 日本锦
”, (Cypriniformes) (Cyprinidae) ,
鲤 隶属于鲤形目 鲤科 进行了生物学特性和病毒敏感性研究 不仅丰富了
(Cyprinus), ,
鲤属 是通过对鲤鱼突变品系不断人工选 锦鲤来源的细胞资源 而且为今后开展锦鲤疱疹病
育、定向培育而成的。锦鲤色彩绚丽、斑纹华丽、 毒病流行病学特征、致病机理、诊断技术以及防控
, 技术研究提供了重要的实验材料。
习性温顺 是世界上最受欢迎的大型观赏鱼之一。
,
此外 锦鲤还是营养丰富、肉质细嫩的食用鱼。
, ,
近年来 随着锦鲤养殖业的发展 其病害问题 1 材料与方法
,
日趋严重 极大地影响了锦鲤养殖业、观赏业和国 1.1 材料
[1-2]
, 1.1.1 , 100 g,
际出口贸易 造成重大经济损失 。锦鲤疱疹病毒 试验鱼与病毒株 锦鲤 体重约 体
(Koi Herpesvirus, KHV) , 20 cm,
病由锦鲤疱疹病毒 引起 主 长约 来源于中国水产科学研究院长江水产研
, ,
要感染锦鲤和鲤鱼 是一种高致病性疾病
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