金黄色葡萄球菌活的非可培养状态复苏及PMA-qPCR检测.pdfVIP

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2017-09-12 发布于山东
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金黄色葡萄球菌活的非可培养状态复苏及PMA-qPCR检测.pdf

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中国科技论文在线金黄色葡萄球菌活的非可培养状态复苏及 PMA-qPCR 检测# ** 田聪，余以刚，肖性龙，吴晖 5 （华南理工大学轻工与食品学院，广州 510640）摘要：为研究金黄色葡萄球菌活的非可培养（VBNC ）状态的复苏问题，采取温度、盐度和酸度 3 个因素复合诱导制备 VBNC 菌，尝试四种复苏方法，并以荧光定量 PCR 和 PMA-qPCR 技术结合的方法进行检测。结果证明: 8%无菌 Tween80 可以使 VBNC 状态金黄色葡萄球菌 48 h 后复苏，同时 PMA-qPCR 能够有效检出VBNC 状态金黄色葡萄球菌，克服传统平板计 10 数法对于 VBNC 菌的漏检。关键词：金黄色葡萄球菌；活的非可培养状态；复苏；PMA；荧光定量 PCR 中图分类号：TS207.4；Q7 Resuscitation of viable but non-culturable state 15 Staphylococcus aureus and PMA-qPCR detection TIAN Cong, YU Yigang, XIAO Xinglong, WU Hui (College of Light Industry and Food Science, South China University of Technology, GuangZhou 510640) Abstract: In order to study the Resuscitation of viable but non-culturable state Staphylococcus 20 aureus, three factors: temperature, salt concentrations and pH were composite to induce VBNC Staphylococcus aureus. Four different resuscitations were attempted, qPCR and PMA in combination with qPCR was established to detect Staphyloccocus aureus. The date shows that the VBNC samples could resuscitate in 48 h after disposed 8%Tween80. At the same time, PMA-qPCR was a effective method for detection of VBNC Staphyloccocus aureus, and could 25 overcome the shortcomings of plate counts. Keywords: Staphyloccocus aureus; viable but nonculturable state; resuscitation; PMA; qPCR 0 引言微生物在自然环境中以多种生理状态存在：可培养的活菌，活的非可培养状态，具有完 3