二甲基联苯胺对斑马鱼胚胎发育及成活率的影响.pdfVIP

2610 河北医药2011年9月 第33卷 第 17期 HebeiMedicalJournal，2011．Vol33SeoNo．17 doi：10．3969／j．issn．1002-7386．2011．17．021 · 论 著 · 二 甲基联苯胺对斑马鱼胚胎发育及成活率的 影响 陈文利 赵梅 杨丽莉 高丽蕙 王合全 王建佳 高翔 陈昌生 【摘要】 目的 应用模式生物斑马鱼的胚胎发育技术，研究3，3’一二甲基联苯胺对鱼类胚胎发育的毒 性作用和成活率影响。方法 受试化合物用甲醇贮备液和蒸馏水配制成水溶液 ，甲醇含量低于0．3％。设 空白对照和 甲醇溶剂对照各一个，3，3’-二 甲基联苯胺的毒性试验浓度分为2．16、4．32、6．48、8．64、 1O．68mg／L5个，分别选用20ml的磨口瓶避光贮存。斑马鱼受精卵收集后马上进行药物暴露浸洗试验， 每个磨口瓶内放入 15枚新采集的受精卵。然后分别放在温度为(28±1)℃的光照培养箱中培养。每2小 时观察一次，每次随机抽取3枚受精卵，进行拍照，并显微观察不同浓度的二 甲基联苯胺对斑马鱼受精卵 及其胚胎发育过程的影响。结果 4．32mg／L以上浓度的药物处理组的斑马鱼受精 卵在胚胎发育早期或 卵期就全部死亡，病死率达到 100％；2．16mg／L3，3’一二甲基联苯胺可以引起半数斑马鱼受精卵及其胚胎 发育的死亡，2．16mg／L低浓度的3，3’-二甲基联苯胺对斑马鱼的胚胎发育有一定的加速作用。结论 高 浓度的二甲基联苯胺对斑马鱼的受精卵及其胚胎发育有严重的毒害和致死作用，2．16mg／L低浓度的3， 3’-二甲基联苯胺对斑马鱼的胚胎发育可能有一定的加速作用。 【关键词】 3，3’一二甲基联苯胺；斑马鱼；胚胎发育；成活率 【中图分类号】 R321-33 【文献标识码】 A 【文章编号】 1002—7386(2011)17—2610—03 联苯胺类化合物属于芳香胺类化学物质，在树脂、橡胶、染 生水解 、氧化、光解等反应 ，符合水生毒理学试验要求。 料等化工产业合成中有广泛应用。以及印染织物的漂洗等多 1．2 试验用鱼及其受精卵的采集 斑马鱼为6个月龄以一t-， 种途径进入环境。由于首先在职业人群中发现膀胱癌的发病 体长4cm左右的红色品种亲鱼。按照雌雄鱼数量约为 1：1的 率较高，故引起了科学家对联苯胺类化学物质的关注。陈纪纲 比例放养在25cm×25cm×30cm的玻璃水族箱中，控制溶氧 通过连续 18年的健康监护，采用病例对照研究发现联苯胺的 0．6mg／L以上，水温 (26±1●℃，pH值 8—8．5，水硬度28— 职业接触人群中膀胱癌发病率超过 1％，是膀胱癌的高危人 32。dH，光暗比13h：11h。每天喂2次经紫外线消毒处理过的 群…。李健等 通过用3，3一二氯联苯胺对 A系小鼠经 口灌 红线虫(水丝蚓)。在缸底铺放一层卵石 ，以诱发亲鱼 自然繁殖 胃，发现可以导致小鼠恶性肿瘤如肺癌、肝胆癌等发生率增高， 产卵受精。根据其间隔性产卵的特点而进行不问断的观察，以 研究表明这类化合物对哺乳动物具有直接或潜在的致癌作用 ， 便及时收集受精卵并转移到预先配制好的蒸馏水内。为尽量 关于联苯胺类化合物对水生生物的毒性研究也有一些报道_3。 避免自来水中所含物质干扰试验结果，受精卵和胚胎发育试验 近年来斑马鱼胚胎毒性试验以其特有的优势正逐步成为急性 的用水 ，均为统一配制、充氧饱和、温度恒定的蒸馏水。未受精 毒性试验的替代手段 ，目前有关3，3’一二 甲基联苯胺对斑 卵在 1～2h内会变为乳 白色，用吸管及时剔出。 马鱼胚胎发育影响还未见研究报道。本研究通过对斑马鱼胚 1．3 仪器设备 (1)DMBA300．C数码照相显微镜；(2)光照培 胎的急性毒性试验，观察胚胎发育期间二甲基联苯胺暴露所导 养箱；(3)可控温加热器；(4)充氧泵；(5)水族箱等。 致鱼卵形态及最终孵化率和成活率的变化，探索其